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3 1 1 2乙酰色氨酸測(cè)定法

本法系用紫外-可見分光光度法（吸收系數(shù)法）測(cè)定人血

. 230 .

白蛋白供試品中的N -乙酰-DL-色氨酸含量。

測(cè)定法用生理氯化鈉溶液將供試品蛋白質(zhì)稀釋至

5 % ,即為供試品溶液。量取供試品溶液0.1ml，分別加入

生理氯化鈉溶液0. 3m l和0. 3m o l/L髙氣酸溶液3. 6ml, 混

勻；另取生理氣化鈉溶液0 .4 m l,加0_3mo l / L 高氣酸溶液

3 .6 m l,混勻，作為空白對(duì)照。室溫放置10分鐘，以每分鐘

3500轉(zhuǎn)離心2 0分鐘，取上清液在波長(zhǎng)280nm處測(cè)定吸光

度，用空白溶液調(diào)零點(diǎn)。按下式計(jì)算供試品中的iV-乙酰-

DL-色氨酸含量：

供試品N -乙酰-DL-色氨酸含量—（A Z8。X n)/5 . 25

(mmol/g) P

式中n 為供試品的稀釋系數(shù)；

5. 2 5為N -乙酰-DL-色氨酸的毫摩爾吸收系數(shù)；

P 為供試品的蛋白質(zhì)含量，g /L。

3 1 1 3苯酚測(cè)定法

本法系依據(jù)溴酸鹽溶液與鹽酸反應(yīng)產(chǎn)生溴，遇苯酚生成

三溴苯酚，過量的溴與碘化鉀反應(yīng)釋出碘，析出的碘用硫代

硫酸鈉滴定液滴定，根據(jù)硫代硫酸鈉滴定液的消耗量，可計(jì)

算出供試品中苯酚的含量。

測(cè)定法精密量取供試品lm l ,置具塞錐形瓶中，加水

50ml, 精密加人0 .0 2m o l/L溴溶液（稱取溴酸鉀0.56g, 加

溴化鉀3g，加水溶解并稀釋至1000ml)15~25ml(供試品含

苯酚量0. 3%.0. 5%時(shí)加25ml，小于0. 3%則加15ml) , 沿

瓶壁加人6mol/L鹽酸溶液1 0m l,搖勻，密塞，在暗處放置

30分鐘后，加25%碘化鉀溶液2ml于具塞錐形瓶頸口，稍啟

瓶塞，使流下，密塞，搖勻。以少量水洗瓶頸，用硫代硫酸

鈉滴定液（0.02mol/L)滴定至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液約

0.5ml，滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。

按下式計(jì)算：

^ 量（；（）—（％ —% )X ^ X 15’ 69X100

式中V。為空白試驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉滴定液的體積，ml;

V ,為供試品消耗硫代硫酸鈉滴定液的體積，ml;

c 為硫代硫酸鈉滴定液的濃度，mol/L;

15. 6 9為苯酚分子量的1 /6。

【附注】（1)硫代硫酸鈉滴定液（0. lm o l/L ) 的制備及標(biāo)

定稱取硫代硫酸鈉26g與無(wú)水碳酸鈉0.20g, 加新沸過的

冷水適量溶解并稀釋至1 0 0 0m l,搖勻，放置1個(gè)月后濾過。

取在12CTC干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀0. 1 5 g ,精密稱定，

置碘瓶中，加水50ml溶解，加碘化鉀2.0g, 輕輕振搖使溶

解，加稀硫酸（5. 7 - 1 0 0 ) 4 0 m l,搖勻，密塞；在暗處放置

10分鐘后，加水250ml稀釋，用本液滴定至近終點(diǎn)時(shí)，加

淀粉指示液(稱取可溶性淀粉0.5g，加水5m l混懸后緩緩傾

人100ml沸水中，隨加隨攪拌，繼續(xù)煮沸2分鐘，冷卻，傾

取上層清液。本液應(yīng)臨用配制）3ml, 繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失

而顯亮綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每lm l硫代

硫酸鈉滴定液（0. lm o l/L )相當(dāng)于4. 903mg重鉻酸鉀。根據(jù)

本液的消耗量與重鉻酸鉀的取用量，算出本液的濃度，

即得。

(2 )硫代硫酸鈉滴定液（0.02mol/L) 的制備精密量取

硫代硫酸鈉滴定液（0. lm o l/L ) 100ml, 加水準(zhǔn)確稀釋至

5 0 0m l,搖勻。

(3 )可做限度測(cè)定。