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重慶市發(fā)布一項山羊化膿隱秘桿菌PCR檢測方法新標(biāo)準(zhǔn) 計劃9月1日起實施
2022年08月10日 15:06:26
來源：化工儀器網(wǎng) 作者：Lani 點擊量：4376
近日，重慶市一項使用PCR檢測方法的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)完成備案——《基于plo基因的山羊化膿隱秘桿菌PCR檢測方法》，并計劃于9月1日起實施。
【化工儀器網(wǎng) 標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布】PCR即聚合酶鏈反應(yīng)，是利用一段DNA為模板，PCR檢測方法在臨床上快速診斷細(xì)菌性傳染病等方面具有極為重要的意義。近日，重慶市一項使用PCR檢測方法的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)完成備案——《基于plo基因的山羊化膿隱秘桿菌PCR檢測方法》，并計劃于9月1日起實施。
DB50/T 1244-2022 基于plo基因的山羊化膿隱秘桿菌PCR檢測方法
《基于plo基因的山羊化膿隱秘桿菌PCR檢測方法》規(guī)定了基于plo基因的山羊化膿隱秘桿菌PCR檢測方法的縮略語、原理、試劑材料、儀器設(shè)備、方法步驟、結(jié)果判定、廢棄物處理等要求。此文件適用于山羊化膿隱秘桿菌病的PCR診斷。
文件針對山羊化膿隱秘桿菌的plo基因，設(shè)計合成特異引物，提取細(xì)菌DNA作為模板，在DNA聚合酶的作用下，經(jīng)高溫變性、低溫退火和中溫延伸的多次循環(huán)，使特異DNA片段的拷貝數(shù)放大數(shù)百萬倍。將擴(kuò)增的DNA片段經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測，凝膠成像儀觀察，可見陽性條帶。該檢測方法，只能從化膿隱秘桿菌基因組DNA中擴(kuò)增出特異條帶。
文件中介紹到的試劑材料包括無水乙醇、核酸染料、DNA上樣緩沖液、瓊脂糖、TSA固體培養(yǎng)基、TSB液體培養(yǎng)基、TAE電泳緩沖液等。介紹的儀器設(shè)備包括電子天平、高壓滅菌鍋、高速離心機(jī)、二級生物安全柜、恒溫培養(yǎng)箱、PCR儀、電泳儀等。
另外，文件對工作中樣品的采集與保存、樣品的處理、DNA的提取、PCR擴(kuò)增等過程也進(jìn)行了詳細(xì)的闡述。要求檢測結(jié)果成立的條件為陽性對照PCR產(chǎn)物經(jīng)電泳后在264bp出現(xiàn)目的條帶，陰性對照PCR產(chǎn)物電泳后沒有條帶，并對結(jié)果描述及判定做了詳細(xì)說明。
文件詳情請見附件。
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