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            產(chǎn)品展廳

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            RT-PCR技術(shù)服務(wù)

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               公司承接各種實(shí)驗(yàn)代做外包服務(wù):石蠟包埋、免疫組化、HE染色、PAS染色、DNA提取、RNA提取、探針、SNP檢測(cè)、WB、EMSA、CCK8檢測(cè)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期檢測(cè)、流式、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、ROS活性氧檢測(cè)、線粒體膜電位檢測(cè)、平板克隆、軟瓊脂克隆、細(xì)胞劃痕、細(xì)胞粘附,并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的高*_端化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測(cè),ELISA試劑盒(免費(fèi)代測(cè))、生化試劑盒、分析標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、食品安全檢測(cè)試劑、動(dòng)物疫病類檢測(cè)產(chǎn)品、獸藥殘留檢測(cè)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)等,應(yīng)用覆蓋藥物分析領(lǐng)域、食品安全領(lǐng)域、聚合物研究領(lǐng)域、環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,客戶廣泛分布于食品、制藥、第三方檢測(cè)、環(huán)境測(cè)試機(jī)構(gòu)、化工、科研院校、生物工程等行業(yè)。


            主營:

            1生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、

            2.ELISA試劑盒、分離液、分離液試劑盒

            3.細(xì)胞:*細(xì)胞、國產(chǎn)腫瘤細(xì)胞、國產(chǎn)正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞

            4.食品安全檢測(cè)試劑、動(dòng)物疫病類檢測(cè)產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)試劑

            5.耗材:常用實(shí)驗(yàn)耗材、移液器


            各種實(shí)驗(yàn)代做:WB代做,免疫組化,PCR代做,細(xì)胞檢測(cè),食品安全檢測(cè)試劑,獸藥殘留檢測(cè)試劑,動(dòng)物疫病類檢測(cè),銷售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品,ELISA試劑盒,細(xì)胞,血清,等等

            供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)

            反轉(zhuǎn)錄PCR(Reverse transcriptase PCR,RT-PCR)是一種從RNA擴(kuò)增cDNA拷貝的方法。RT-PCR對(duì)于獲得與克隆mRNA的5’、3’末端序列和從非常少量的mRNA樣品構(gòu)建大容量的cDNA文庫方面都是極為靈敏與通用的方法。此外,RT-PCR還易于鑒定已轉(zhuǎn)錄序列是否發(fā)生突變及呈現(xiàn)多態(tài)性,還可用于測(cè)定基因表達(dá)的強(qiáng)度。我公司采用二步RT-PCR法,可滿足客戶不同的實(shí)驗(yàn)要求。
            樣品要求:提供的樣品要新鮮并盡可能多,不推薦提供RNA樣品,或者提供cDNA,并盡可能詳細(xì)的提供背景資料(基因序列、Genebank accession number擴(kuò)增產(chǎn)物的用途等)。


            RT-PCR技術(shù)服務(wù)?基本步驟:
            ● 模板制備:見RNA提取技術(shù)服務(wù)。
            ● 引物設(shè)計(jì)
                客戶提供上、下游引物,或者我公司提供免費(fèi)的引物設(shè)計(jì)及合成(包括RT-PCR半定量檢測(cè)中的內(nèi)參引物)。
            ● 反轉(zhuǎn)錄
            (1)Microtube管中配制下列模板RNA/引物混合液,全量<15 μl。

             

             試劑名稱  使用量
             模板RNA  2μg
             Oligo(dT)12-18 Primer(50μM)  2.5μl

            (2)70℃保溫5分鐘后迅速在冰上急冷2分鐘以上。 
            (3)離心數(shù)秒鐘使模板RNA/引物的變性溶液聚集于Microtube管底部。 
            (4)在上述Microtube管中配制下列反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液。

             

             試劑名稱  使用量
             上述模板RNA/引物變性溶液  
             5×M-MLV Buffer  5μl
             dNTP Mixture(各10 mM)  1.25μl
             RNase Inhibitor(40 U/μl )  25U
             M-MLV(200 U/μl )  200U 
             RNase free dH2O  up to 25μl

            42℃保溫1小時(shí)。 
            (5)70℃保溫15分鐘后冰上冷卻,得到cDNA溶液。
            若需要表達(dá),參考基因表達(dá)服務(wù)。若需要進(jìn)行RT-PCR半定量分析,接著以下的操作。
            ● RT-PCR半定量分析
            PCR擴(kuò)增目的基因及看家基因,產(chǎn)物經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳后進(jìn)行灰度掃描分析。

            RNA模板的制備需另收費(fèi)(見RNA提取服務(wù))以上為1個(gè)目的基因的報(bào)價(jià)。進(jìn)行相對(duì)定量分析時(shí),同一材料的多個(gè)目的基因的價(jià)格=1個(gè)目的基因價(jià)格×目的基因個(gè)數(shù)。
            提供結(jié)果
            完整的實(shí)驗(yàn)操作步驟、電泳圖、定量分析結(jié)果等。

            RT-PCR技術(shù)服務(wù)參照:



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