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            i-PTH試劑盒

            具體成交價以合同協(xié)議為準
            產品標簽

            i-PTH ELISA

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            供貨周期 一個月 應用領域 化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥

            i-PTH試劑盒

            一、產品概述


            全段甲狀旁腺素劑i-PTH試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿、細胞上清或其它相關生物液體中全段甲狀旁腺素(i-PTH)的含量。該試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),具有操作簡便、靈敏度高、特異性強、重復性好等特點。

            二、檢測原理


            試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人全段甲狀旁腺素(i-PTH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP 標記的檢測抗體,經過溫育并徹di洗滌。用底物 TMB 顯色,TMB 在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人全段甲狀旁腺素(i-PTH)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

            三、試劑盒組成


            名稱96 孔配置48 孔配置備注
            微孔酶標板12 孔 ×8 條12 孔 ×4 條
            標準品0.3mL0.3mL
            樣本xi釋液6mL3mL
            檢測抗體 - HRP10mL5mL
            20× 洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋
            底物 A6mL3mL
            底物 B6mL3mL
            終止液6mL3mL
            封板膜2 張2 張
            說明書1 份1 份
            自封袋1 個1 個
            注:標準品濃度依次為:80、40、20、10、5、0 pg/mL。


            四、樣本收集、處理及保存方法


            1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

            2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。

            3. 細胞上清液:3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

            4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。

            5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于 - 20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

            五、自備物品


            1. 酶標儀(450nm)。

            2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL。

            3. 37℃恒溫箱。

            六、操作注意事項


            1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶wan全溶解后再使用。

            2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

            3. 預處理后的樣本無需稀釋,直接取 10μL 加樣即可。

            4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

            5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

            七、操作步驟


            1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

            2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;

            3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL,再加樣本xi釋液 40μL;

            4. 隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

            5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。

            6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。

            7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內,在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

            八、結果判斷


            繪制標準曲線:在 Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應 OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

            九、試劑盒性能


            1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù) R 值,大于等于 0.9900。

            2. 靈敏度:最di檢測濃度小于 0.1 pg/mL。

            3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

            4. 重復性:板內變異系數(shù)小于 10%、板間變異系數(shù)小于 15%。

            十、貯藏及有效期


            1. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

            2. 有效期:6 個月。

            十一、注意事項


            1. 本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷。

            2. 試劑盒使用前應平衡至室溫,使用后應及時放回 2-8℃保存。

            3. 洗滌過程要充分,避免殘留物質影響檢測結果。

            4. 底物 A 和底物 B 應避免長時間暴露在空氣中,使用后應立即蓋好瓶蓋。

            5. 終止液為強酸,使用時應注意安全,避免接觸皮膚和眼睛。

            6. 實驗過程中應嚴格遵守操作規(guī)程,避免交叉污染。

            7. 如出現(xiàn)任何質量問題,請及時與本公司聯(lián)系。

             



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