人肝素酶（HPA）ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)
| 參考價(jià) | ￥ 2650 |
| 訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 上海滬鼎生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 上海滬鼎
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2018/1/25 17:01:56
- 訪問(wèn)次數(shù) 2579
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上海滬鼎生物科技有限公司坐落于上海市松江臨港科技城漢橋文化科技園，是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的生物企業(yè)。公司具有完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)開(kāi)發(fā)實(shí)驗(yàn)室，成熟的抗體研發(fā)系統(tǒng)，熟練掌握各種生物學(xué)技術(shù)，結(jié)合公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì)，可以有效的保證公司產(chǎn)品強(qiáng)的穩(wěn)定性和高的準(zhǔn)確性，同時(shí)又具有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格。公司目前可以提供多種生物學(xué)檢測(cè)試劑盒、進(jìn)口常規(guī)生化試劑、抗體、化學(xué)試劑、藥典級(jí)試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、血清等產(chǎn)品，覆蓋分子生物學(xué)、生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、蛋白組學(xué)、生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。公司以提供生命科學(xué)科研用檢測(cè)試劑為主，致力于為各大高等院校、科研機(jī)構(gòu)、診斷試劑生產(chǎn)廠家以及生物制藥公司的廣大客戶們提供高質(zhì)量生物產(chǎn)品。
上海滬鼎生物自主研發(fā)的ELISA試劑盒，現(xiàn)已涵蓋20多個(gè)種屬，數(shù)千種產(chǎn)品，涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個(gè)研究領(lǐng)域。
公司與眾多國(guó)內(nèi)外大學(xué)、重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、科研院所、企事業(yè)單位有著長(zhǎng)期的良好合作。且在合作過(guò)程中，公司所表現(xiàn)出的專業(yè)、務(wù)實(shí)和坦誠(chéng)態(tài)度，獲得了合作者的贊譽(yù)。
上海滬鼎生物人特別感謝以下合作單位多年以來(lái)的支持與信任！
部分合作單位
ELISA試劑盒,生物試劑,培養(yǎng)基,血清,抗體,細(xì)胞等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|
人肝素酶(HPA)ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)
檢測(cè)范圍： 96T
15pg/ml-500pg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中肝素酶(HPA)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人肝素酶(HPA)水平。用純化的人肝素酶(HPA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肝素酶(HPA)，再與HRP標(biāo)記的肝素酶(HPA)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝素酶(HPA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人肝素酶(HPA)濃度。
試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品（960pg/ml） | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個(gè) |
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
- 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
480pg/ml | 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
240pg/ml | 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
120pg/ml | 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
60pg/ml | 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
30pg/ml | 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
- 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液：將30倍（48T的20倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
- 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
- 溫育：操作同3。
- 洗滌：操作同5。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
- 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié)：
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
- 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
- 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月
采購(gòu)中心
化工儀器網(wǎng)