人乳腺上皮細(xì)胞；MCF-10A價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱  人乳腺上皮細(xì)胞；MCF-10A價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性

培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 5%HS + 10ug/ml insulin + 20ng/ml EGF + 100ng/ml 霍亂毒素 + 0.5ug/ml 氫化松

傳代方法

傳代情況

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR Amelogenin：X；CSF1PO：10,12；D12S391：17,20；D13S317：8,9；S16S539：11,12；D18S51：18,19；D19S433：13,15；D21S11：28,30；D2S1338：21,26；D3S1358：14,18；D5S818：10,13；D6S1043：12,18；D7S820：10,11；D8S1179：14,16；FGA：22,24；Penta E：13,14；TH01：8,9.3；TPOX：9,11；vWA：15,17；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT 小鼠碳酸酐酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CD31(PECAM-1)/PE 熒光素PE標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh DVL1 蓬亂蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Rotavirus IgG 輪狀病毒 IgG(間接法二步法)

6-Mar 英文名稱： 膜相關(guān)環(huán)指蛋白6抗體 0.2ml

Anti-CD31(PECAM-1)/PE 熒光素PE標(biāo)記血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- N-terminal (1a) 鋅指脂蛋白-1a(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Sialic14 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素14抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh OPCML 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

XPNPEP2 Kit Human 人 XPNPEP2 ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TWSG1 英文名稱： 扭轉(zhuǎn)原腸胚形成同源蛋白1抗體 0.2ml

CLDND1 英文名稱： 膜蛋白CLDND1抗體 0.1ml

NcoI規(guī)格：1000 units

NdeI規(guī)格：500 units

NdeI規(guī)格：2500 units

NdeI規(guī)格：4000 units

NotI規(guī)格：300 units

NotI規(guī)格：1500 units

NotI, HC規(guī)格：1500 units

NotI規(guī)格：500 units

PaeI (SphI)規(guī)格：500 units

PaeI (SphI)規(guī)格：2500 units

PstI規(guī)格：3000 units

PstI規(guī)格：5x3000 units

PstI規(guī)格：10000 units

PvuI規(guī)格：300 units

PvuI規(guī)格：1500 units

PvuII規(guī)格：2500 units

PvuII, HC規(guī)格：12500 units

PvuII規(guī)格：5000 units

SalI規(guī)格：1500 units

SalI規(guī)格：5x1500 units

SalI規(guī)格：2000 units

SduI (Bsp1286I)規(guī)格：500 units

SmaI規(guī)格：1200 units

SmaI規(guī)格：5x1200 units

SmaI, HC規(guī)格：6000 units

Dlx5 英文名稱： 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體 0.2ml

Anti-5-HTR3 5-羥色胺受體3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-Btk(Ser180) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠蛋白激酶ATK抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-ED-1/FITC 熒光素標(biāo)記外胚層發(fā)育不良抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CTBP1 C端結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

/BSA 與血清白蛋白偶聯(lián)物 2mg

KGF 英文名稱： 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子7抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh VEGFR1/FLT1 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1抗體 規(guī)格 0.1ml

Anti-ED-1/FITC 熒光素標(biāo)記外胚層發(fā)育不良抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml