細(xì)胞名稱  人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；MuM-2B培養(yǎng)
形態(tài)特性 多角

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；20mM Hepes

傳代方法 1：

3傳代；2~3天1次。  

傳代情況 P21

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）　

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；MuM-2B培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
Anti-TNF-alpha/ TNF- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記鼠抗人壞死因子-α單克隆抗體 IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PDGF-A 血小板源性生長(zhǎng)因子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 Anti-TIMP-2 0.1ml

5HT5A receptor 英文名稱： 5-羥色胺受體5A抗體 0.2ml

E2F3 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Kidins220 (Ser918) 磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

PDGF-A 血小板源性生長(zhǎng)因子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素釋放激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標(biāo)記畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Defensin β1 防御素β1抗體 規(guī)格 0.1ml

Guinea pig IgG/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記豚鼠IgG 0.1ml

phospho-LSP1 (Ser204) 英文名稱： 磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 0.1ml

頭包啦啶單克隆抗體 小鼠單抗 0.5

Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標(biāo)記畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
白脂素(Asprosin)ELISA試劑盒人96T7.8-500 ng/mL小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒，英文名：TFPI ELISA Kit白脂素(Asprosin)ELISA試劑盒人96T7.8-500 ng/mL小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒，英文名：TFPI ELISA KiISA Kit for Human Axin-2小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)ELISA試劑盒，英文名：AMY2A ELISA Kit人膜聯(lián)蛋白-A4(Anxa4)ELISA試劑盒人96T0.078-5 ng/mL小鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒，英文名：VB12 ELISA KiISA Kit for Human Retinal dehydrogenase 1小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒，英文名：Hsp-40 ELISA Kit人存活素(Surv)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒，英文名：LFA-3/CD58 ELISA KiISA Kit for Human Beta-casein小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒，英文名：MMP-9 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Axin-2小鼠胰α淀粉酶(AMY2A)ELISA試劑盒，英文名：AMY2A ELISA Kit人巨噬唾液酸蛋白(Macrosialin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒，英文名：CR ELISA KiISA Kit for Human C-type lectin domain family 4 member E小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒，英文名：LIF ELISA Kit人Cathelicidin 抗菌肽(CAMP)ELISA試劑盒人96T125-8000 pg/mL小鼠V-Ha-Ras肉瘤病毒基因同源物(HRAS)ELISA試劑盒，英文名：HRAS ELISA KiISA Kit for Human Calcitonin小鼠17羥皮質(zhì)類(lèi)固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒，英文名：17-OHCS ELISA Kit人小肌營(yíng)養(yǎng)蛋白結(jié)合蛋白1 (Dysbindin)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠組織蛋白酶K(CTSK)ELISA試劑盒，英文名：CTSK ELISA KiISA Kit for Human L-dopachrome tautomerase小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)ELISA試劑盒，英文名：IGFBP1 ELISA Kit
改良Western及IP細(xì)胞裂解液 100ml

Phospho-ZAP70 (Tyr493) 英文名稱： 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser494) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DYX2/KIAA0319 英文名稱： 閱讀障礙相關(guān)蛋白DLX2抗體 0.2ml

SOD1 SOD1 / Superoxide Dismutase 兔單抗 (FITC) Human
IL-11 人白介素-11Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CHK2 細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NUMB 膜相關(guān)蛋白Numb抗體 規(guī)格 0.2ml

Acrylamide  100g

Phospho-TLK1(Ser695) 英文名稱： 磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 0.1ml

Cyclin G2 英文名稱： 周期素G2抗體 0.1ml

Anti-CHK2 細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml