大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)酶聯(lián)免疫試劑盒
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌 R&D/美國
- 型號
- 產(chǎn)地 進口/國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2018/6/11 11:36:54
- 訪問次數(shù) 526
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 48T/96T |
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貨號 | YS-elisa-3230 | 主要用途 | 科研 |
大鼠組織蛋白去乙?;?HD)酶聯(lián)免疫試劑盒ELISA的操作要點?
優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準確可靠的必要條
件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學檢驗一般均用板式點。
本文將敘述板式ELISA各個操作步驟的注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試
劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有詳細的使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出
準確的結(jié)果。
規(guī)格 | 英文名稱 | 試劑名稱 |
48T/96T | Rat histone deacetylase (HD) ELISA Kit | 大鼠組織蛋白去乙?;?HD)酶聯(lián)免疫試劑盒 |
大鼠組織蛋白去乙?;?HD)酶聯(lián)免疫試劑盒◇試劑測定可按以下操作步驟進行?
?用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌)
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
?用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
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