注意事項(xiàng)

1、使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。

2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。

4、所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。

5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。

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產(chǎn)品名稱(chēng)：支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4

貨號(hào)：YS-02X9988

產(chǎn)品分類(lèi):細(xì)胞培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸

實(shí)驗(yàn)材料：

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶

2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞

3、50ml離心筒2個(gè)

4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>

2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無(wú)菌培養(yǎng)器皿中

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

牛蒡子苷;Arctiin 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) GoldCassette-HIS/HIS重組標(biāo)簽蛋白快速檢測(cè)試劑盒(精裝)2次2次、10次

槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O- 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 20mg/支 角質(zhì)素抗體 TDH ELISA Kit L-蘇氨脫(TDH)ELISA試劑盒

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鹽達(dá)克羅寧（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Dyclonine hydrochloride COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii

日蟾毒它靈;Gamabufalin 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 5%糖發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

銀杏B 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 20mg 化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 COL4α1 ELISA Kit Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒

強(qiáng)力海克鹽 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Doxycycline Hyclate 人腺腺細(xì)胞英文名稱(chēng)：MDA-MB-415

龜對(duì)照藥材 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 1g 15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體 NOP58 ELISA Kit 核仁蛋白58(NOP58)ELISA試劑盒

重樓皂苷II 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 20mg 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體 HSP20 ELISA Kit 熱休克蛋白20(HSP20)ELISA試劑盒

支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基86189-69-7非洛地平 規(guī)格： 100mg

630-94-4去氫鉤藤 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

蔗果四糖 規(guī)格： 20mg

84676-89-1黃芪皂II 規(guī)格： HPLC≥98%,10mg/支

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竹葉柴胡 規(guī)格： 5.0g

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37921-38-3升 規(guī)格： 20mg