免疫組化試劑盒使用說明書
- 公司名稱 上海研謹生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/1/14 8:44:35
- 訪問次數(shù) 3539
聯(lián)系方式：楊小姐13585717991 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
公司主營： 各種實驗代做：WB代做，免疫組化，PCR代做，細胞檢測，食品安全檢測試劑，獸藥殘留檢測試劑，動物疫病類檢測，銷售高品質(zhì)標準品，對照品，ELISA試劑盒，細胞，血清，等等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|
免疫組化試劑盒使用說明書
工作原理：
辣根過氧化物酶（HRP）的分子量（40000），它不會遮蓋抗原的結(jié)合部位，具有較高活性及特異性，可溶性佳，生成的產(chǎn)物不擴散，可作用于多種底物，產(chǎn)生不同顏色且HRP穿透力強，易進入細胞內(nèi)。DAB在 H2O2存在的情況下，可以作為HRP的電子供體，產(chǎn)生褐色的不溶顆粒，可作為顯色的試劑。
試劑盒內(nèi)容：
| 名稱 | 規(guī)格 |
1 | 0.01mol/L pH6.0枸櫞酸鹽緩沖液 | 1L |
2 | PBS緩沖液 | 2L |
3 | 廣譜二抗 | 3mL |
4 | 30%H2O 2 | 10 mL |
5 | DAB顯色液I | 0.6mL |
6 | DAB顯色液II | 0.6mL |
自備試劑：無水乙醇、蘇木素。
操作步驟：
1. 60℃常規(guī)脫蠟至水后，將石蠟切片先后浸入二甲本苯Ⅰ，二甲本苯Ⅱ各10min。然后逐級降濃度酒精入水，每次3-5 min。
① | 無水灑精 | 3－5min |
② | 90% 酒精 | 3－5min |
③ | 85% 酒精 | 3－5min |
④ | 75% 酒精 | 3－5min |
⑤ | PBS洗滌3次 | 每次5 min |
2.熱修復抗原： 將切片置于0.01mol/L pH6.0枸櫞鈉緩沖液，微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10 min后，反復1-2 次，置于室溫自然冷卻。0.01 mol/L pH6.0的PBS洗滌3次，每次5 min
3.消除內(nèi)源性過氧化物酶：用3% H 2 O 2 室溫孵育 5-10 min，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS洗滌2-3次，每次5 min；
4.滴加一抗： 滴加適當稀釋的一抗到切片上，37℃孵育1小時左右或者4℃過夜， pH7.4的PBS洗滌3次，每次5 min 。（一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強度不夠時，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時間；背景過高時，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時間。）
5.加入廣譜二抗，37℃孵育1小時，取出后PBS洗滌3次，每次5 min。
6.DAB顯色： 取DAB顯色液I及II各50微升加至入1mL的水中，配成DAB工作液，滴加到切片上，室溫顯色，鏡下控制反應時間。若無背景出現(xiàn)則可繼續(xù)顯色。蒸餾水充分洗滌以終止反應。
7..觀察顯色后自來水沖，蘇木目精復染1-2min，，自來水沖10min，梯度酒精脫水，二甲本苯透明，中性樹膠封片，干燥，分析拍照
采購中心
化工儀器網(wǎng)