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            Mem-PER真核細(xì)胞膜蛋白抽提試劑盒

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                   賽默飛世爾科技賽默飛世爾科技(紐約證交所代碼:TMO)是科學(xué)服務(wù)領(lǐng)域的世界領(lǐng)導(dǎo)者。公司年銷售額超過250億美元。在全球擁有約70,000名員工。我們的使命是攜手客戶,讓世界更健康、更清潔、更安全。我們幫助客戶加速生命科學(xué)領(lǐng)域的研究、解決在分析領(lǐng)域所遇到的復(fù)雜問題與挑戰(zhàn),促進(jìn)醫(yī)療診斷發(fā)展、加速藥物上市進(jìn)程、提高實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)力。我們?nèi)虺^75,000名賽默飛員工將借助于一系列行業(yè)領(lǐng)先的品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific、Unity Lab Services和Patheon,為客戶提供另想的創(chuàng)新技術(shù)、便捷采購方案和全方位服務(wù)。

                  欲了解更多信息,請瀏覽公司網(wǎng)站:www.thermofisher.com 賽默飛世爾科技中國簡介賽默飛世爾科技進(jìn)入中國發(fā)展已超過35年,在中國的總部設(shè)于上海,并在北京、廣州、香港、成都、沈陽、西安、南京、武漢、昆明等地設(shè)立了分公司,員工人數(shù)約為5000名。我們的產(chǎn)品主要包括分析儀器、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、試劑、耗材和軟件等,提供實(shí)驗(yàn)室綜合解決方案,為各行各業(yè)的客戶服務(wù)。為了滿足中國市場的需求,現(xiàn)有7家工廠分別在上海、北京、蘇州和廣州等地運(yùn)營。我們在全國還設(shè)立了8個應(yīng)用開發(fā)中心以及示范實(shí)驗(yàn)室,將世界級的前沿技術(shù)和產(chǎn)品帶給中國客戶,并提供應(yīng)用開發(fā)與培訓(xùn)等多項(xiàng)服務(wù);擁位于上海的中國創(chuàng)新中心,擁有有100多位專業(yè)研究人員和工程師及70多項(xiàng)專利。創(chuàng)新中心專注于針對垂直市場的產(chǎn)品研究和開發(fā),結(jié)合中國市場的需求和國外先進(jìn)技術(shù),研發(fā)適合中國的技術(shù)和產(chǎn)品;我們擁有遍布全國的維修服務(wù)網(wǎng)點(diǎn)和特別成立的中國技術(shù)培訓(xùn)團(tuán)隊,在全國有超過2600名專業(yè)人員直接為客戶提供服務(wù)。我們致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。

                  欲了解更多信息,請登錄網(wǎng)站:www.thermofisher.com 全國服務(wù)熱線:021-61621892公司電子郵箱:sales.china@thermofisher.com

            科學(xué)儀器

              傳統(tǒng)分離膜蛋白的方法繁瑣而耗時,并且都需要梯度分離和昂貴的超高速離心儀器。而Thermo Scientific Mem-PER真核細(xì)胞膜蛋白抽提試劑盒是一種快速、簡單、便宜的膜蛋白分離方法。使用該試劑盒的三種試劑可以從培養(yǎng)的哺乳動物、酵母細(xì)胞以及軟或硬的哺乳動物組織中抽提并選擇性地富集膜蛋白。
              產(chǎn)品特點(diǎn):
              • 的降低了親脂(膜)蛋白組份中參雜的親水性蛋白的交叉污染(一般< 10%)。
              • 適用于多種培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞、酵母細(xì)胞以及哺乳動物組織。
              • 與SDS-PAGE、蛋白免疫印跡, 蛋白定量分析等下游應(yīng)用兼容(詳見相關(guān)產(chǎn)品)。
              • 提供簡單完整的方法,使用該方法可以在大約1小時以內(nèi)從哺乳動物細(xì)胞、組織以及酵母細(xì)胞中分離膜蛋白。
              • 僅需臺式微量離心機(jī)和離心管。
              使用Thermo Scientific Mem-PER 真核細(xì)胞膜蛋白抽提試劑盒來溶解和分離酵母膜內(nèi)蛋白(釀酒酵母菌株EGY-194)向濕重大10-15mg的細(xì)胞沉淀中加入80μlMem-PER 試劑 A和100-150mg、尺寸為405-600μm的酸洗玻璃珠并在室溫渦旋10分鐘來破裂酵母細(xì)胞的細(xì)胞壁。短暫離心收集玻璃珠,然后將細(xì)胞裂解物轉(zhuǎn)移到新的離心管中并將離心管置于冰上。用720 μl Mem-PER試劑B和C洗滌收集的玻璃珠然后將洗滌液加入到細(xì)胞裂解液中并在冰上孵育30分鐘。樣本進(jìn)行4-12%Bis-Tris凝膠電泳。
              分別對從大鼠肝(圖A)和大鼠心(圖B)制備的膜蛋白進(jìn)行蛋白免疫印跡。利用蛋白免疫印跡對通過Mem-PER 試劑制備的疏水(膜蛋白)成分和相應(yīng)的親水成分進(jìn)行分析,分別對VDAC (31 kDa, Affinity BioRegeants),cellugyrin (29 kDa, BDTransduction Laboratories)及flotillin-1 (48 kDa, BD Transduction Laboratories)進(jìn)行免疫印跡分析。M = 膜蛋白組份,H =親水組份。
              對Thermo Scientific Mem-PER 試劑溶解的蛋白進(jìn)行分級。使用Mem-PER真核細(xì)胞膜蛋白抽提試劑盒對三種細(xì)胞系的蛋白進(jìn)行溶解和抽提。每組疏水(膜蛋白)和親水組分均通過標(biāo)準(zhǔn)操作獲得,利用蛋白質(zhì)免疫印跡分析四種細(xì)胞定位已知的蛋白。利用SDS-PAGE/蛋白質(zhì)免疫印記分析對COX4進(jìn)行分析之前,使用SDS-PAGE樣品制備試劑盒去除膜組分中的去垢劑。所有碎片組分中檢測到的蛋白污染量極低??s寫: AchE = 乙酰酯酶, COX4 =細(xì)胞色素氧化酶4亞基,hsp90 =熱休克蛋白90, M = 可溶性膜蛋白組分,H = 親水性蛋白組分。
              參考文獻(xiàn)
              Chattopadhyay, K., et al. (2006).J. Immunol. 177, 3920-3929
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