NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC8843

產(chǎn)品名稱：Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/48S

Na+k+—ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 抗逆

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：Na+k+ ——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

別名：Na+k+――ATP酶試劑盒 Na+k+ ――ATP酶測(cè)試盒

規(guī)格：100T/48S

檢測(cè)方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲(chǔ)存條件：Store at -20℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中，可催化ATP水解生成ADP和無機(jī)磷。

Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機(jī)磷，通過測(cè)定無機(jī)磷的量來確定ATP酶活性。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn))

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣本的制備：

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清;按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200w，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次)：8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

組織：稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清(漿)樣本：直接檢測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1、可見分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至660nm，可見分光光度計(jì)需用蒸餾水調(diào)零。

三、Na+K+-ATP酶活計(jì)算

1、血清(漿)Na*K*-ATPase活力的計(jì)算：

larbio

定義：規(guī)定每小時(shí)每毫升血清(漿)中Na⁺K⁺- ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。

Na⁺K⁺-ATP酶活力(U/mL)=C標(biāo)x(A測(cè)定-A對(duì)照)+(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xV 總+V 樣+TxF

=7.5x(A測(cè)定-A對(duì)照)+(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xF

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中Na*K*-ATPase活力的計(jì)算：

(1)按蛋白濃度計(jì)算：

定義：規(guī)定每小時(shí)每毫克組織蛋白中Na⁺K⁺-ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。

Na⁺K⁺-ATP酶活力(U/mg prot)=C標(biāo)x(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白) xV總÷ (CprxV樣) ÷TxF

=7.5x(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)+CprxF

(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算：

定義：規(guī)定每小時(shí)每克組織中Na⁺K⁺-ATP酶分解 ATP產(chǎn)生lμmoL無機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。

Na⁺K⁺-ATP酶活力(U/g質(zhì)量)=C標(biāo)x(A 測(cè)定-A對(duì)照)+(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xV總+(V樣+V 樣總xW)÷TxF

-7.5x(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)÷WxF

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：

定義：規(guī)定每小時(shí)每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞中Na⁺K⁺-ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。

Na⁺K⁺-ATP酶活力(U/104cell)=C標(biāo)x(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xV 總÷(V 樣÷V 樣總xN)÷TxF

=7.5x(A測(cè)定-A對(duì)照)+(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xF

C標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.5μmol/mL：V總：酶促反應(yīng)總體積，0.25mL;V樣：加入樣本體積，0.1mL：V樣總：加入試劑一體積，1mL;T：反應(yīng)時(shí)間，1/6小時(shí)：Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL：W：樣本質(zhì)量，g;N：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，以萬計(jì)：F：樣本稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng)：

1、由于每一個(gè)樣都必須做對(duì)照，本試劑盒100管保證測(cè)48份Na*K*-ATP酶。

2、此法具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。所以對(duì)測(cè)定所用試管要求嚴(yán)格無磷。

Na+k+—ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 抗逆 

產(chǎn)品訂購信息：

BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit 100T/48S