HG-GB001 人顆粒酶B ELISA檢測試劑盒
| 參考價 | ￥ 6800 |
| 訂貨量 | ≥1件 |
- 公司名稱 柏萊源（天津）生物科技有限公司
- 品牌 譜新生物
- 型號 HG-GB001
- 產(chǎn)地
- 廠商性質 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/4/7 14:53:48
- 訪問次數(shù) 57
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
人顆粒酶B ELISA 檢測試劑盒說明書
貨號：HG-GB001
產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測（ELISA）法，將人顆粒酶B標準品和待測樣本加入預包被抗人顆粒酶B抗體的酶標板，然后加入稀釋后的生物i素標記的人顆粒酶B檢測抗體，最后加入 Streptavidin-HRP，形成抗體+抗原+抗體‐Biotin+ SA‐HRP 復合物，洗板后加入 TMB 顯色液顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下由無色轉化成藍色并在終止液的作用下最終轉化成黃色。黃色的深淺與樣本中被檢測到的人顆粒酶B的量呈正相關。
檢測范圍： 6.86~5000 pg/mL
靈敏度：1.12 pg/mL
規(guī)格：
96T
應用：
適用于生物制品純化工藝過程的優(yōu)化、中間工藝過程的雜質控制以及終產(chǎn)品的放行檢測。
試劑盒組成：
| 組分 | 規(guī)格 | 配制 |
| 標準品Standard | S0~S7,S | 按說明書進行操作 |
| 包被酶標板Coated Plate | 8孔x12條 | 即用型 |
| 檢測緩沖液Assay Buffer | 12mL x1瓶 | 即用型 |
| 濃縮洗液Wash Buffer(10×) | 50 mL×1瓶 | 用超純水進行10倍稀釋 |
| 檢測抗體Dection Antibody | 6mL xl瓶 | 即用型 |
| 酶結合物Streptavidin-HRP | 12mL xl瓶 | 即用型 |
| TMB顯色液TMB Substrate | 12 mL×1瓶 | 即用型 |
| 終止液Stop Solution | 12 mL×1瓶 | 即用型 |
| 封板膜Sealing film | 5張 | 即用型 |
| 說明書 | 1份 | 即用型 |
備 注:所有組分存儲溫度均為 2~8℃，有效期12個月。
需自行準備的材料
◆酶標儀
◆去離子水
◆恒溫培養(yǎng)箱
◆全新濾紙
◆微量移液器及吸頭
◆渦旋振蕩器
實驗前準備
1.所有試劑以及待測樣本需要恢復室溫。所有試劑現(xiàn)配現(xiàn)用。
2.1x洗液配制：濃縮洗液平衡至室溫，不要有結晶?；靹蚝蟾鶕?jù)用量，取適量用超純水按1：9的比例，將10x洗液稀釋10倍，最終得到1x洗液。
3.標準品的配制:
●?血清和血漿樣本，使用即用型標準品S0~S7。
●?其他類型樣本，使用高濃度標準品S（50000pg/mL）進行梯度稀釋。準備8個1.5mL離心管，按照標準品濃度依次標記。取30μL標準品S+270μL SPB(即樣品基質,如培養(yǎng)基、稀釋液、自制buffer等) ，所得溶液濃度為5000pg/mL。每個離心管中加入200μL SPB，將5000pg/mL的高濃度標準品按1：2進行梯度稀釋。SPB用作零標準（0pg/mL）。
操作步驟
使用前所有試劑組分以及待測樣本需要恢復室溫。建議所有的標準品和待檢樣本進行雙復孔測定。
1. 試劑準備：提前準備好各種待測試劑、稀釋好的標準品和待測樣本。
2. 酶標板條確定：計算待測樣本和標準品所需酶標板條，將酶標條從鋁箔袋取出，剩余的酶標條放回鋁箔袋中并封好袋口，低溫保存。
3. 每孔加入50μL檢測緩沖液。
4. 樣本及檢測抗體孵育：加入標準品和待測樣本，50 μL/孔，確保 15 min 內完成點樣。再向每孔加入50 μL 檢測抗體。用封板膜封板，置于恒溫孵育器，500轉/分鐘、25℃孵育1小時。
5. 洗板：棄去孔中液體，加入 1×洗液（300 μL/孔）洗板4次，拍干酶標板中殘留液體。
6. 酶結合物孵育：將酶結合物加入酶標板中，100 μL/孔，用封板膜封板，置于恒溫孵育器，500轉/分鐘、25℃孵育30分鐘。
7. 洗板：同步驟5。
8. 顯色：每孔加入 100 μl 顯色底物 TMB，室溫孵育15~20 分鐘。
9. 終止：每孔加入 100 μL終止液，輕輕震動酶標板至顯色均勻。
10. 讀值：20 min 內讀取 450nm/630nm 波長處的吸光度值。450nm 作為檢測波長，630nm 作為參比波長。
結果處理
1. 標準曲線OD處理（見下例，僅為示例，具體以實際測定為準）
| 標準品濃度(pg/mL) | OD1 | OD2 | 平均值 |
| 5000 | 3.4680 | 3.4540 | 3.4610 |
| 1666.67 | 1.6813 | 1.4737 | 1.5775 |
| 555.56 | 0.7201 | 0.7241 | 0.7221 |
| 185.19 | 0.2709 | 0.2741 | 0.2725 |
| 61.73 | 0.0973 | 0.0932 | 0.0953 |
| 20.58 | 0.0396 | 0.0387 | 0.0392 |
| 6.86 | 0.0187 | 0.0273 | 0.0230 |
| 0 | 0.0085 | 0.0082 | 0.0084 |
2. 標準品理論濃度與對應 OD 值以四參數(shù)進行擬合，得到標準曲線(如下圖所示)。
注意事項
1.樣品首i次檢測，建議進行至少3個連續(xù)倍數(shù)的稀釋，以在標曲范圍內產(chǎn)生至少一個稀釋后樣品。
2.試劑按標簽說明儲存，使用前室溫平衡。
3.包被酶標板使用前請平衡至室溫再打開外包裝袋，實驗中不用的板條立即放回包裝中密封，4℃可保存一個月。其他不用的試劑應包裝好或蓋好。
4.實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
5.使用前檢查試劑盒內各種試劑。試劑的稀釋、加樣和終止反應應充分混勻或搖勻對實驗結果尤為重要。
6.洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在潔凈的紙巾上充分拍干，直至看不到水印。勿將紙巾放入反應孔中吸水。
7.底物顯色液對光敏感，避免長時間暴露于光下，避免與金屬接觸影響結果。
8.本產(chǎn)品為一次性使用的試劑盒，請在效期內使用。
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柏萊源（天津）生物科技有限公司的優(yōu)勢：
現(xiàn)貨供應：公司庫存充足，可快速發(fā)貨，減少用戶等待時間。
效期保障：嚴格把控產(chǎn)品質量，確保試劑效期新鮮，保障實驗結果的可靠性。
專業(yè)技術支持：提供詳細的實驗方案和技術指導，幫助用戶優(yōu)化實驗條件，提高實驗成功率。
定制化服務：根據(jù)用戶需求，提供個性化的產(chǎn)品和服務解決方案。
售后保障：完善的售后服務體系，及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。
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