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全自動磁性固相萃取對血漿兒茶酚胺的提取和凈化
檢測樣品:血漿
檢測項目:兒茶酚胺提取和凈化
方案概述:使用WCX磁性固相萃取劑,結(jié)合AUTOM32全自動萃取儀,提取和凈化血漿中兒茶酚胺類目標(biāo)物。經(jīng)LC-MS/MS分析測試,線性良好,結(jié)果準(zhǔn)確精密,符合基本定量測試的方法學(xué)要求。同時,磁性固相萃取技術(shù)(mSPE)結(jié)合全自動提取系統(tǒng)AUJTOM32,大幅度減傳統(tǒng)SPE的移液操作和人為實(shí)時監(jiān)測,節(jié)約了人力成本,并顯著降低人為因素在前處理中的影響。
嗜鉻細(xì)胞瘤(Pheochromocytoma)是一種罕見疾病,每十萬人中的年診斷率為1~2例。其中約30%為遺傳患者,臨床表現(xiàn)為陣發(fā)性高血壓、頭痛、心悸、高血糖等,可能會伴有致死性心血管并發(fā)癥。嗜鉻細(xì)胞瘤會引起兒茶酚胺的分泌增加,因此測定血漿中兒茶酚胺、去甲腎上腺素及其代謝物對臨床診斷有重要價值。 通常,血漿中兒茶酚胺測定包括多巴胺(DA)、去甲腎上腺素(NE)、腎上腺素(E),以及它們的代謝物3-甲氧酪胺(3-MT)、去甲變腎上腺素(NMN)、變腎上腺素(MN),化學(xué)信息如下表。它們均為堿性強(qiáng)極性化合物,通常使用離子交換原理的SPE材料進(jìn)行提取和凈化。
如下圖,WCX吸附劑鍵合了羧酸根基團(tuán),在溶劑體系pH值中性或偏堿性條件下電離并帶負(fù)電荷,以電荷吸引作用吸附目標(biāo)化合物正離子|M+達(dá)到捕集的效果。通過調(diào)節(jié)溶劑pH值至3以下時,羧酸根飽和 而處于電中性,失去電荷吸引的【 M】+被洗脫至溶劑中,從而實(shí)現(xiàn)與雜質(zhì)的分離與凈化。
結(jié)果與討論
綜上數(shù)據(jù)可以看出,使用WCX磁性固相萃取劑,結(jié)合AUTO M32全自動萃取儀,提取和凈化血漿中兒茶酚胺類目標(biāo)物。經(jīng)LC-MS/MS分析測試,線性良好,結(jié)果準(zhǔn)確精密,符合基本定量測試的方法學(xué)要求。同時,磁性固相萃取技術(shù)(mSPE)結(jié)合全自動提取系統(tǒng)AUJTO M32,大幅度減傳統(tǒng)SPE的移液操作和人為實(shí)時監(jiān)測,節(jié)約了人力成本,并顯著降低人為因素在前處理中的影響。
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