匯智和源生物技術(shù)(蘇州)有限公司
臍帶血單個(gè)核細(xì)胞分離方法和注意事項(xiàng)
檢測(cè)樣品:臍帶血
檢測(cè)項(xiàng)目:血細(xì)胞與單個(gè)核細(xì)胞分離
方案概述:臍帶血是指胎兒出生時(shí)臍帶內(nèi)及胎盤近胎兒一側(cè)血管內(nèi)的血液。臍帶血單個(gè)核細(xì)胞(CordBloodMononuclearCell,CBMC)分離自正常人胎盤臍帶組織,是臍帶血中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞等,是機(jī)體防御系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分。
臍帶血是指胎兒出生時(shí)臍帶內(nèi)及胎盤近胎兒一側(cè)血管內(nèi)的血液。臍帶血單個(gè)核細(xì)胞(Cord Blood Mononuclear Cell,CBMC) 分離自正常人胎盤臍帶組織,是臍帶血中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞等,是機(jī)體防御系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分。
1 原理
單個(gè)核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與其它細(xì)胞不同,在沉降過程中不同比重的細(xì)胞會(huì)處于不同的分布位置。因此,可利用各種血細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞比重之間的差異將各種血細(xì)胞與單個(gè)核細(xì)胞分離開來。
2 方法
1) 取新鮮抗凝臍帶血,按照1:1比例加入RPMI 1640培養(yǎng)基,將血液進(jìn)行稀釋(以降低血液粘稠度),輕柔混勻,備用。
2) 向無菌離心管內(nèi)加入適量的單個(gè)核細(xì)胞分離液,將稀釋后的臍帶血平鋪到分離液液面上方(分離液:稀釋臍帶血=1:2),保持兩液面界面清晰。
3) 800g,室溫,離心 20min-30min(注:設(shè)置較慢的加速度和減速度,如果有十檔,設(shè)為第三檔)。
4) 離心結(jié)束后,吸棄血漿層,小心吸取CBMC層(即白膜層)并轉(zhuǎn)移至15mL離心管中。離心結(jié)束后,管內(nèi)液面從上至下依次為稀釋血漿層、CBMC層、分離液層和紅細(xì)胞層(見圖1)。
圖1 稀釋臍帶血離心前后的分層狀態(tài)圖
5) 向離心管中加入10mL 的RPMI 1640培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞,250g,室溫離心 10min ,棄上清。重復(fù)該步驟 1~2 次,即可用于后續(xù)試驗(yàn)。
3 注意事項(xiàng)
1) 血液新鮮程度是影響分離效果的關(guān)鍵因素,請(qǐng)盡量使用采集后24h內(nèi)的血液進(jìn)行CBMC分離。
2) 為保證細(xì)胞的活力,整個(gè)操作過程請(qǐng)輕柔,避免對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械性的損傷。
3) 為保持細(xì)胞狀態(tài)良好,請(qǐng)盡量縮短整個(gè)試驗(yàn)的周期。
4 臍帶血單個(gè)核細(xì)胞分離試劑盒
IPHASE/匯智和源針對(duì)人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞分離的特點(diǎn),開發(fā)了人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞分離試劑盒。該試劑盒包含單個(gè)核細(xì)胞分離液和洗滌液兩個(gè)組分,各成分對(duì)細(xì)胞無毒性,不會(huì)影響細(xì)胞的原始狀態(tài);同時(shí),該試劑盒操作簡(jiǎn)單便捷,可大大縮短細(xì)胞分離時(shí)間,分離所得細(xì)胞純度高、狀態(tài)好、得率高。
5 相關(guān)產(chǎn)品
關(guān) 于 我 們
匯智和源,致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學(xué)研究機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)的生物試劑,IPHASE為公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
相關(guān)產(chǎn)品清單
溫馨提示:
1.本網(wǎng)展示的解決方案僅供學(xué)習(xí)、研究之用,版權(quán)歸屬此方案的提供者,未經(jīng)授權(quán),不得轉(zhuǎn)載、發(fā)行、匯編或網(wǎng)絡(luò)傳播等。
2.如您有上述相關(guān)需求,請(qǐng)務(wù)必先獲得方案提供者的授權(quán)。
3.此解決方案為企業(yè)發(fā)布,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由上傳企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
最新解決方案
- 美國FTC質(zhì)構(gòu)儀用于止血海綿物理性能檢測(cè)
- 紅外顯微鏡AIMsight測(cè)試針灸針表面涂層成分及分布
- Ultimate Plus-C18 測(cè)定血清樣本中的卡泊芬凈
- Ultimate LP-C18測(cè)定檸檬酸消毒液中檸檬酸含量
- 電熱恒溫培養(yǎng)箱在血清實(shí)驗(yàn)中的實(shí)踐
- 醫(yī)用口罩安全新標(biāo)準(zhǔn):譜育科技頂空-氣相色譜法精準(zhǔn)檢測(cè)環(huán)氧乙烷殘留
- 頂空氣相色譜法測(cè)定血液中甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、丙酮和正丁醇含量
- 酸脫蛋白-石墨爐原子吸收光譜法測(cè)定血中鉛含量
- 頂空-氣相色譜法測(cè)定尿中1-溴丙烷含量
- 頂空–氣相色譜法測(cè)定尿液中丙酮含量
該企業(yè)的其他方案
- 自身免疫性疾病及白血病研究重要的原材料-外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)
- IPHASE BALB/c小鼠肝溶酶體研發(fā)成功
- 體外DMPK研究-藥物Ⅰ相代謝穩(wěn)定性研究方法及數(shù)據(jù)分析
- 代謝酶相關(guān)DDI評(píng)估之CYP酶的時(shí)間依賴性抑制(TDI)研究
- 化學(xué)品體外生物富集性評(píng)估的“利器”-虹鱒魚肝S9和肝細(xì)胞
- 藥物非臨床體外研究的關(guān)鍵“武-器”——原代肝細(xì)胞
- 藥物非臨床研究?jī)?yōu)選體外代謝模型——微粒體
- 小核酸藥物體外研究整體解決方案
- 藥物代謝酶CYP450代謝表型研究體外評(píng)估模型解析
- 超低吸附培養(yǎng)板:細(xì)胞3D球狀體模型制備神器
業(yè)界頭條
- 總投資超2.5億元!武漢大學(xué)中南醫(yī)院高端醫(yī)
-
武漢大學(xué)中南醫(yī)院計(jì)劃購置超高端磁共振成像儀、超高端X線計(jì)算機(jī)斷層掃描儀(CT)、正電子發(fā)射及X射線計(jì)...