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            制藥

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            褐藻膠寡糖中的甘露糖醛酸單糖和古羅糖醛酸單糖含量的測(cè)定

            檢測(cè)樣品:褐藻膠寡糖

            檢測(cè)項(xiàng)目:甘露糖醛酸單糖 古羅糖醛酸單糖

            方案概述:在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域,褐藻膠寡糖可作為糖尿病、肥胖癥、直腸結(jié)腸癌、習(xí)慣性便秘患者的療效食品;在飼料領(lǐng)域,褐藻寡糖克服了以往所有抗生素、益生素、酶制劑等的不足,用量少、天然、無(wú)殘留且穩(wěn)定性強(qiáng),并能提高動(dòng)物機(jī)體的抗病能力,促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),增加動(dòng)物營(yíng)養(yǎng),是優(yōu)良的飼料添加劑。

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            更新時(shí)間2023年04月10日

            上傳企業(yè)青島盛瀚色譜技術(shù)有限公司

            下載方案

            褐藻膠寡糖具有多種生物學(xué)功能,有整腸和解毒、降血糖血脂、抗凝血、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等作用。


            在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域,褐藻膠寡糖可作為糖尿病、肥胖癥、直腸結(jié)腸癌、習(xí)慣性便秘患者的療效食品;在飼料領(lǐng)域,褐藻寡糖克服了以往所有抗生素、益生素、酶制劑等的不足,用量少、天然、無(wú)殘留且穩(wěn)定性強(qiáng),并能提高動(dòng)物機(jī)體的抗病能力,促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),增加動(dòng)物營(yíng)養(yǎng),是優(yōu)良的飼料添加劑。

             

            圖片


            褐藻膠是由1,4-甘露糖醛酸 (M)和1,4-古羅糖醛酸(G)不規(guī)則鏈接起來(lái)的線性長(zhǎng)鏈分子,采用不同的降解方法(酸降解法,酶降解法,氧化降解法)降解褐藻膠,可以得到聚合度20以下的系列褐藻膠寡糖,由β-D-聚甘露糖醛酸(M)和α-L-聚古羅糖醛酸(G)組成的線型低聚合物,有聚甘露糖醛酸(PM)、聚古羅糖醛酸(PG)和雜合褐藻寡糖(PMG)三種類型產(chǎn)品。


            褐藻膠寡糖是一種淡黃褐色粉末,能溶于水,穩(wěn)定性強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)中使用具有脈沖安培檢測(cè)器的高效陰離子交換色譜對(duì)褐藻膠寡糖中的甘露糖醛酸單糖和古羅糖醛酸單糖進(jìn)行檢測(cè)。詳情如下:

             

            儀器和設(shè)備

             

            表1 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所使用的儀器設(shè)備

            圖片

             

             

             

            試劑和材料

             

            除非另有說(shuō)明,所用試劑均為優(yōu)級(jí)純。

            水:超純水(18.2MΩ•cm);

            50%氫氧化鈉:色譜純;

            無(wú)水乙酸鈉:優(yōu)級(jí)純。

            古羅糖醛酸單糖(客戶提供):2mmol/L;

            甘露糖醛酸單糖(客戶提供):2mmol/L。

             

            樣品的制備

             

            精密稱取褐藻膠G段寡糖0.1088g,用超純水溶解稀釋定容到100mL,經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾,直接進(jìn)樣分析。

            精密稱取褐藻膠寡糖0.1049g,用超純水溶解稀釋定容到100mL,經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾,直接進(jìn)樣分析。

            將古羅糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品(客戶提供)稀釋20倍,直接進(jìn)樣分析。

            將甘露糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品(客戶提供)稀釋20倍,直接進(jìn)樣分析。

             

            分析步驟

             

            色譜條件

            流動(dòng)相:

            溶劑A:超純水;

            溶劑B:250mM氫氧化鈉;

            溶劑C:250mM氫氧化鈉+500mM乙酸鈉水溶液。


            表2 淋洗液梯度變化表

            圖片


            流  速:0.5mL/min;

            柱  溫:30℃;

            進(jìn)樣量:25μL;

            色譜柱:Dionex CarboPac PA20 Analytical色譜柱,150 mm×3mm,配Dionex CarboPac PA20 Guard保護(hù)柱30 mm×3 mm。


            電化學(xué)檢測(cè)器參數(shù)

            模式:脈沖安培;檢測(cè)頻率:2Hz;反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)Ts=200ms;Flexcell金電極。


            表3 檢測(cè)器波形設(shè)置

            圖片

            衰減200μA;濾波器0.050Hz


            標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

            0.1mmol/L古羅糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

            圖片

             

            0.1mmol/L甘露糖醛酸單糖標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

            圖片

            空白色譜圖

            空白試樣的色譜圖

            圖片

            樣品測(cè)定

            褐藻膠G段寡糖色譜圖

            圖片

            褐藻膠寡糖色譜圖

            圖片

             

            結(jié)果與計(jì)算

             

             

             

            表4  檢測(cè)結(jié)果(含量%)

            圖片

            備注:①ND表明未檢出或低于檢出限;②測(cè)定值已扣除空白值;③不同方法、不同實(shí)驗(yàn)室間檢測(cè)結(jié)果會(huì)存在差異。

             

             

             

             

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            青島盛瀚色譜技術(shù)有限公司

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