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豬肉中四種硝基呋喃類(lèi)代謝物殘留量的測(cè)定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法

閱讀：1640 發(fā)布時(shí)間：2012-5-18
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一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
本文使用天津博納艾杰爾科技有限公司的Cleanert PEP-2固相萃取柱、Venusil MP C18色譜柱和AB SCIEX公司的API 4000+質(zhì)譜儀，遵照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《豬肉、牛肉、雞肉、豬肝和水產(chǎn)品中硝基呋喃類(lèi)代謝物殘留量的測(cè)定（GB/T 20752-2006）》提供的方法，檢測(cè)豬肉中的4種硝基呋喃類(lèi)代謝物殘留。
二．實(shí)驗(yàn)方法
2.1.樣品信息
2.2.樣品提取
稱(chēng)取豬肉樣品2g（到0.01g），置于50m棕色離心管中，加入15ml甲醇-水混合溶液（v:v=2：1），均質(zhì)1min，8000r/min離心5min 吸取上清液倒掉，殘?jiān)屑尤?/span>2ppb的硝基呋喃類(lèi)代謝物混合標(biāo)準(zhǔn)品各1ml，混合均勻。
2.3.水解和衍生（注意避光）
向棕色離心管中加入20ml 0.2mol/l的鹽酸溶液，渦旋1min使之混合均勻，之后加入0.3ml濃度為0.05mol/L的2-硝基苯甲醛，混勻，于37℃溫水中避光衍生16小時(shí)。
2.4.凈化處理
將衍生后的樣品冷卻至室溫，加入5ml 0.1mol/l的磷酸氫二鉀，并用1 mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)PH約為7.4，混合均勻。之后用8000r/min離心10min,以小于2ml/min的流速過(guò)PEP-2小柱（規(guī)格為60mg/3ml，用5ml甲醇、5ml水活化），并用10ml的水洗滌固相萃取小柱，然后負(fù)壓抽干柱子15min。用5ml乙酸乙酯洗脫于20ml棕色瓶中，并在40℃下氮?dú)獯蹈伞?/span>
用樣品定容溶液（10ml乙腈，0.3ml的乙酸用水稀釋至100ml）定容至1ml，充分溶解，并用0.2um濾膜過(guò)濾。
2.5.檢測(cè)方法
色譜柱：Vesusil^® MP-C18（2.1×150mm，5um，100Å）
質(zhì)譜儀：API 4000⁺
流動(dòng)相：A:0.1%甲酸的水溶液
B:0.1%甲酸的乙腈溶液
流速：0.2mL/min

表1 梯度洗脫條件

時(shí)間（min）

A（%）

B（%）

0

80

20

1

80

20

3

50

50

7

25

75

7.1

5

95

10

5

95

10.1

80

20

16

80

20

進(jìn)樣體積：5μL
離子源：電噴霧（ESI），正離子模式
掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）
表2 質(zhì)譜儀離子源參數(shù)

Source/Gas

Collision Gas（CAD）

6

Curtain Gas（CUR）

15

Ion Source Gas 1（GS 1）

50

Ion Source Gas 2（GS 2）

50

Ion Spray Voltage（IS）

5500

Temperature（TEM）

600

Interface Heater（ihe）

On

表3 4種硝基呋喃待測(cè)物母離子和子離子參數(shù)表

物質(zhì)名稱(chēng)

保留時(shí)間（min）

監(jiān)測(cè)離子對(duì)

DP

EP

CE

CXP

SEM

8.10

209.1/166.1

51

10

17

10

209.1/192.1

51

10

17

10

AHD

8.30

249.2/134.1

61

10

20

10

249.2/104.1

66

10

31

10

AOZ

8.89

236.2/134.1

61

10

20

10

236.2/104.1

56

10

31

10

AMOZ

3.12

335.3/291.2

46

10

19

10

335.5/128.1

46

10

19

10

圖1 4種硝基呋喃代謝物總離子

圖2 SEM（209/166）質(zhì)譜圖

圖3 AOZ（236/134）質(zhì)譜圖

圖4 AHD（249/134）質(zhì)譜圖

圖5 AMOZ（335/291）質(zhì)譜圖

三．實(shí)驗(yàn)結(jié)果
0.5ppb豬肉基質(zhì)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

表4 豬肉中0.5ppb加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

名稱(chēng)

1#

2#

3#

平均回收率

RSD

AMOZ

109.43%

97.84%

109.75%

105.67%

6.42%

SEM

91.81%

88.91%

88.22%

89.65%

2.12%

AHD

80.68%

82.11%

77.25%

80.01%

3.12%

AOZ

83.94%

80.70%

80.85%

81.83

0.02%

四．實(shí)驗(yàn)結(jié)論
Agela Cleanert^® PEP-2、Agela Venusil^® MP C18和AB SCIEX公司的API 4000+質(zhì)譜儀用于豬肉中4種硝基呋喃代謝物的檢測(cè)，性能良好，符合國(guó)標(biāo)文件的要求。

訂貨信息

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格/包裝

訂貨號(hào)

定價(jià)（元）

Cleanert^® PEP-2

60mg/3mL，50支/包

PE0603-2

1035.00

Venusil^® MP C18

2.1×150mm，5um，100Å；1支

VA951502-0

3200.00

博納艾杰爾科技參展CPhI &P-MEC，

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提示

時(shí)間（min）	A（%）	B（%）
0	80	20
1	80	20
3	50	50
7	25	75
7.1	5	95
10	5	95
10.1	80	20
16	80	20

Source/Gas
Collision Gas（CAD）	6
Curtain Gas（CUR）	15
Ion Source Gas 1（GS 1）	50
Ion Source Gas 2（GS 2）	50
Ion Spray Voltage（IS）	5500
Temperature（TEM）	600
Interface Heater（ihe）	On

物質(zhì)名稱(chēng)	保留時(shí)間（min）	監(jiān)測(cè)離子對(duì)	DP	EP	CE	CXP
SEM	8.10	209.1/166.1	51	10	17	10
SEM	8.10	209.1/192.1	51	10	17	10
AHD	8.30	249.2/134.1	61	10	20	10
AHD	8.30	249.2/104.1	66	10	31	10
AOZ	8.89	236.2/134.1	61	10	20	10
AOZ	8.89	236.2/104.1	56	10	31	10
AMOZ	3.12	335.3/291.2	46	10	19	10
AMOZ	3.12	335.5/128.1	46	10	19	10

名稱(chēng)	1#	2#	3#	平均回收率	RSD
AMOZ	109.43%	97.84%	109.75%	105.67%	6.42%
SEM	91.81%	88.91%	88.22%	89.65%	2.12%
AHD	80.68%	82.11%	77.25%	80.01%	3.12%
AOZ	83.94%	80.70%	80.85%	81.83	0.02%

產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格/包裝	訂貨號(hào)	定價(jià)（元）
Cleanert^® PEP-2	60mg/3mL，50支/包	PE0603-2	1035.00
Venusil^® MP C18	2.1×150mm，5um，100Å；1支	VA951502-0	3200.00

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