濕熱滅菌的原理是使微生物的蛋白質(zhì)及核酸變形導(dǎo)致其死亡。這種變形是分子中的氫鍵分裂，當(dāng)氫鍵斷裂時(shí)，蛋白質(zhì)及核酸內(nèi)結(jié)構(gòu)被破壞，而喪失了原有能。蛋白質(zhì)及核酸的這種變形可以是可逆的，也可以是不可逆的。雖然無所謂動能行結(jié)構(gòu)被破壞，若氫鍵破裂的數(shù)量未達(dá)到微生物死亡的臨界值，則其分子很可能恢復(fù)到它原有的形式，微生物就沒有被殺死。為有效地使蛋白質(zhì)變形，如采用壓蒸汽滅菌時(shí)，就需要水蒸氣有足夠的溫度和持續(xù)時(shí)間，這對滅菌效果十分重要。溫飽和水蒸氣可迅速使蛋白質(zhì)變形，在規(guī)定操作條件下，蛋白質(zhì)發(fā)生變形的過程即微生物死亡的過程，是可預(yù)見和重復(fù)的。微生物的滅活符合動力學(xué)方程，微生物死亡速率是微生物耐熱參數(shù)D和殺滅時(shí)間的函數(shù)。即在給定的時(shí)間下被滅活的微生物與仍然存活數(shù)成正比。

LgNt=lgNo-F(T,Z) /DT

Nt:t分鐘后微生物計(jì)數(shù)值;

No:初始微生物計(jì)數(shù)值;

DT:在T溫度下的微生物降低個(gè)對數(shù)單位所需要的時(shí)間，分鐘;

F(T，Z):滅菌程序在確定溫度系數(shù)Z的T溫度的等效滅菌時(shí)間。

濕熱滅菌的方法

影響濕熱滅菌的主要因素有:微生物的種類與數(shù)量、蒸汽的性質(zhì)、藥品性質(zhì)和滅菌時(shí)間等。

(1)通蒸氣滅菌法:是在常壓條件下，采用100攝氏度通蒸氣加熱殺滅微生物的方法，滅菌時(shí)間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐熱制劑的滅菌，但不能保證殺滅所有芽孢，是非可靠的滅菌方法。

(2)間歇蒸汽滅菌法:利用反復(fù)多次的通蒸汽加熱，殺滅所有微生物，包括芽胞。方法同通蒸汽滅菌法，但要重復(fù)3次以上，每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱過夜，目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃溫，可將溫度降至75℃~80℃，加熱延長為30~60分鐘，并增加次數(shù)。適用于不耐熱的含糖或牛奶的培養(yǎng)基。

(3)壓蒸汽滅菌法:103.4千帕蒸汽壓溫度達(dá)121.3℃，維持15-20分鐘。

濕熱滅菌法濕熱法可在較低的溫度下達(dá)到與干熱法相同的滅菌效果，因?yàn)?①濕熱中蛋白吸收水份，更易凝固變性;②水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能;③蒸汽有潛熱存在，每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能，可迅速提物體的溫度。

濕熱滅菌法般采用121℃，滅菌20-30min，如果是產(chǎn)孢子的微生物則應(yīng)采用滅菌后適宜溫度下培養(yǎng)幾小時(shí)，再滅菌次，以用于殺死剛剛萌發(fā)的孢子。

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濕熱滅菌的方法

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