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            研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
            中級會員 | 第18年

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            食品農(nóng)殘檢測
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            標(biāo)準品

            科研試劑盒實驗中緩沖溶液等試劑的配置

            時間:2013-8-21閱讀:1178
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            ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),ELISA試劑盒以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗,把各種ELISA配置方法匯總?cè)缦拢?br />(1) ELISA實驗包被緩沖液
            (2) ELISA實驗洗滌緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液
            (3) ELISA實驗稀釋液;
            (4)ELISA實驗終止液
            (5)ELISA底物緩沖液
            (6)ELISA實驗TMB
            (四甲基聯(lián)苯胺)使用液
            (7) ELISA實驗ABTS使用液
            (8)ELISC。

            試劑

            (1) ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):

            NaHCO3 1.59克

            NaHCO3  2.93克

            加蒸餾水至1000ml

            (2) ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M

            KH2PO4       0.2克

            Na2HPO4·12H2O  2.9克

            NaCl        8.0克

            KCl         0.2克

            Tween-20 0.05%  0.5ml

            加蒸餾水至1000ml

            (3) ELISA實驗稀釋液:

            牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

            加洗滌緩沖液至100ml

            或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。

            (4)  ELISA試劑盒 實驗終止液(2M H2SO4):

            蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。

            (5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):

            0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml

            0.1M 檸檬酸(19.2克/L)      24.3ml

            加蒸餾水50ml。

            (6) ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:

            TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml

            底物緩沖液(PH5.5)    10ml

            0.75%H2O2 32μl

            (7) ELISA實驗ABTS使用液:

            ABTS        0.5mg

            底物緩沖液(PH5.5)  1ml

            3%H2O2 2μl

            (8)ELISA實驗封閉液:

            牛血清白蛋白(BSA) 5克

            加洗滌緩沖液至100ml。

            值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。

            生物幫推薦 ELISA試劑盒 相關(guān)產(chǎn)品,詳情見:封閉試劑、終止溶液、封閉肽、ELISA稀釋液、ELISA試劑盒、ELISA緩沖液、ELISA洗脫緩沖液

            為了保證ELISA實驗的準確性,實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標(biāo)孔,嚴防交叉污染。

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