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當(dāng)前位置：上海聯(lián)碩生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>膠原酶如何配置及使用方法
膠原酶的化學(xué)名為膠原蛋白水解酶，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結(jié)構(gòu)，而不損傷其他蛋白質(zhì)和組織。
膠原酶的化學(xué)本質(zhì)是一種蛋白質(zhì)，因此它對(duì)溫度、PH和導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構(gòu)象和性質(zhì)。
配置：
膠原酶溶液同胰蛋白酶一樣配置、消毒滅菌和儲(chǔ)藏。
注意：
因?yàn)镮型膠原酶分子顆粒比胰酶大，不容易過(guò)濾，因此可以用蔡式濾器過(guò)濾除菌。
鈣、鎂離子和血清成分不會(huì)影響膠原酶的消化作用，因而可用BSS（如D-hanks或者PBS）或含血清的培養(yǎng)液配置。
使用方法：
1、將漂洗、修剪干凈的組織剪成1-2mm左右的小塊。
2、將組織放入離心管或三角燒瓶中加入30-50倍體積的膠原酶溶液，旋緊蓋子或密封燒瓶。
3、將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內(nèi)每隔3分鐘振搖一次，如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。
4、收集消化液（有時(shí)含個(gè)別組織塊及沒(méi)有充分消化的組織碎屑則需用100目不銹鋼網(wǎng)過(guò)濾），離心1000r/min，5min，除去上清，用Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液離心漂洗1-2次，除去上清，加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)瓶。
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