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            上海聯(lián)碩生物科技有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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            免疫組化準(zhǔn)備

            時(shí)間:2009-11-16閱讀:1314
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            免疫組化準(zhǔn)備

            zui重要的是選擇好一抗、二抗或者還有三抗,注意抗體的特異性、效價(jià)和交叉反應(yīng),用單抗。
            其他常用試劑有:
            1、0.01M(pH7.4)的磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS),稀釋抗體和洗片子用;
            2、清潔液、純水,洗玻片用
            3、多聚賴氨酸處理載玻片,防止脫片
            4、固定液:4%多聚甲醛或冷丙酮等;
            5、15%~30%蔗糖,組織脫水用;
            6、梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋,或者OCT包埋做冰凍切片;
            7、抗原修復(fù)液:枸櫞酸緩沖液(pH6.0);
            8、活化劑:EDTA或者Triton X-100;
            9、1%~10%牛血清清蛋白(BSA)封閉液;
            10、H2O2,滅活內(nèi)源性過氧化物酶;
            11、顯色液:根據(jù)你做的酶來(lái)選擇,如果是HRP就用DAB,如果是AKP,就用NBT/BCIP,免疫熒光則不需要;
            12、50%緩沖甘油封片液。


             

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