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水稻microRNA的效應復合體和靶標
2009年11月10日,北京生命科學研究所戚益軍實驗室在The Plant Cell雜志在線發(fā)表題為“水稻microRNA的效應復合體和靶標”的研究論文。該論文報道了水稻中microRNA (miRNA)效應復合體的生化特性,并在基因組水平系統(tǒng)分析了受miRNA調(diào)控的靶標基因。
miRNAs是一類在真核生物中廣泛存在的,可以調(diào)控靶標基因表達的非編碼RNAs。miRNAs通過與Argonaute蛋白結合后形成基因沉默效應復合體,切割靶標mRNA或抑制其翻譯。水稻(Orzya_sativa)編碼四個Argonaute1同源基因(AGO1a, AGO1b, AGO1c, and AGO1d)。戚益軍實驗室利用RNAi方法同時敲除了水稻的四個AGO1基因,發(fā)現(xiàn)轉基因植株具有復雜的發(fā)育表型,并且許多miRNAs的靶標基因表達量上升。作者純化了其中三個AGO1復合體,AGO1a,AGO1b,和AGO1c。研究發(fā)現(xiàn)這三個AGO1蛋白都具有切割mRNA的活性,并且它們都對U 起始的小分子RNA具有偏好性。作者進一步克隆了與AGO1結合的小分子RNAs并進行高通量測序,發(fā)現(xiàn)AGO1s主要結合已知的miRNAs,而且大部分miRNAs均勻地分配到每一個AGO1中,表明這些AGO1s具有功能上的冗余性。同時,該研究還發(fā)現(xiàn)了一部分miRNAs只進入其中某一個或某兩個AGO1蛋白,說明這些AGO1s在功能上也具有一定的特異性。本研究還對水稻MiRNAs的標靶基因進行了全基因組水平的分析和驗證,發(fā)現(xiàn)這些目標靶基因編碼包括參與重要發(fā)育的轉錄因子和參與其它各種生理過程的蛋白,揭示了miRNAs在水稻生長發(fā)育過程中發(fā)揮著非常重要而廣泛的作用。
北京生命科學研究所博士研究生武亮,技術員張青青和周環(huán)宇為該文章的共同*作者,論文的其他作者還有倪方銳和鄔雪影。戚益軍博士為本文的通訊作者。此項研究為科技部863計劃和北京市科委資助課題,在北京生命科學研究所完成。
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