抗平滑肌抗體SMA的檢測(cè)方法

    抗平滑肌抗體（smoothmuscleantibody，SMA）見(jiàn)于多種自身免疫病。鼠肝、腎、人甲狀腺和血小板等組織與平滑肌的肌動(dòng)球蛋白具有共同的抗原性。因此，以純化的肌漿球蛋白為抗原可進(jìn)行沉淀試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、放射免疫測(cè)定和酶免疫技術(shù)以檢測(cè)SMA。但目前常用的是以平滑肌為抗原基質(zhì)片的間接免疫熒光法，現(xiàn)介紹如下。

    1．平滑肌組織冰凍切片  將大鼠處死，剖腹取胃，切取一塊胃壁組織，洗凈后立即冰凍。用冷凍切片機(jī)切成4～6／1m，貼于清潔玻片上，迅速用電風(fēng)扇吹干。置干燥器內(nèi)4℃存放，可用1～2個(gè)月。

    2．操作步驟

    （1）將待測(cè)血清用0．01mol／L，pH7．4PBS作1：10稀釋，以正常人血清和已知SMA陽(yáng)性血清同法稀釋作為對(duì)照。

    （2）將稀釋血清滴加于底物片上，室溫、濕盒內(nèi)反應(yīng)30rain。

    （3）用PBS流洗除去多余血清后，再于PBS中浸洗3次。分別為5min、5min、10rain（以下同）。

    （4）吹干后，滴加zui適工作濃度的熒光素標(biāo)記抗人IgC。室溫、濕盒內(nèi)反應(yīng)30min后按上述方法洗滌。

    （5）吹干后，用無(wú)自發(fā)熒光的緩沖甘油封片，熒光顯微鏡檢查。用鼠胃作底物片時(shí)，在粘膜下肌層呈現(xiàn)熒光為陽(yáng)性。陽(yáng)性時(shí)可將血清再進(jìn)一步稀釋以測(cè)定抗體滴度。

    3．臨床意義  SMA主要見(jiàn)于自身免疫性（狼瘡樣）肝炎，可用以同SLE鑒別。原發(fā)性膽汁性肝硬化和慢性活動(dòng)性肝炎時(shí)，此抗體檢出率也高，但后者SMA效價(jià)甚低。急性病毒性肝炎時(shí)SMA陽(yáng)性率可達(dá)80％，多在發(fā)病第1周出現(xiàn)。正常人SMA為陰性，中、老年人群中陽(yáng)性率可達(dá)5%左右。

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