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            生物芯片法檢測沙眼衣原體抗體

            時間:2009/9/25閱讀:419
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            生物芯片法檢測沙眼衣原體抗體

             

                [檢測方法生物芯片法

                [方法學(xué)原理以微孔濾膜為載體,利用微陣列技術(shù)將純化的沙眼衣原體(CT)特異性蛋白固定于同一膜片上,并利用微孔濾膜的滲濾、濃縮、凝集作用,使抗原抗體反應(yīng)在固相膜上快速進(jìn)行,再以免疫金作為標(biāo)記物直接在膜上顯色。顯色后的芯片放人芯片識別儀,在軟件的支持下對不同點陣的灰度值進(jìn)行分析。

                [標(biāo)本準(zhǔn)備取新鮮末梢血或靜脈血,分離血清后,如果試驗在采血后24h不能進(jìn)行,應(yīng)將其在-20環(huán)境中保存。檢測時,應(yīng)使樣本恢復(fù)至室溫。

                [試劑]

                1.蛋白芯片

                2.試劑A(洗滌液

                3.試劑B(金溶膠試劑

                [儀器蛋白芯片檢測系統(tǒng)

                [檢測步驟]

                1.在芯片上標(biāo)記樣品編號。

                2.在芯片盒窗口內(nèi)滴加4滴試劑A,使膜表面*浸濕。

                3.待*滲入后,室溫環(huán)境中放置lmin,加待檢血清100u1

                4.待血清*滲入后,及時滴加6滴試劑B。

                5.待試劑B*滲入后,滴加6滴試劑A

                6.反應(yīng)完畢后30rain內(nèi),將芯片放人餅片閱讀系統(tǒng)進(jìn)行分析。

                [結(jié)果判斷]

                檢測結(jié)果1CT陰性,提示沒有被感染。

                檢測結(jié)果2CT陽性,提示被CT感染。

                [正常參考值沙眼衣原體抗體陰性

                [注意事項]

                1.從28環(huán)境中取出的芯片須在室溫環(huán)境中平衡至少10min后方可使用。

                2.采取血樣時患者無須禁食。

                3.新鮮血樣在28環(huán)境下存放不要超過48h;長期保存的樣本應(yīng)在-20以下環(huán)境中凍存,避免反復(fù)凍融。

                4.芯片反應(yīng)窗口中的膜不能損傷或受潮:

                l芯片應(yīng)在有效期內(nèi)使用。若陽性控制點不顯色說明芯片已失效,換新的芯片重做。

                6.殘余的標(biāo)本與使用過的芯片盒按生物危險品進(jìn)行消毒處理。

                7.操作時要戴手套,檢測完畢*洗手。

                8.如不慎讓任何試劑接觸眼部,立即用大量清水沖洗。

                9.其他問題請參見芯片操作指南或與本公司。

                [臨床意義沙眼衣原體有15種血清型,其中A、B、Ba、C4種血清型主要與地方性沙眼有關(guān);DK型可在生殖道感染、結(jié)膜炎和嬰兒肺炎中發(fā)現(xiàn);L1、L2、L33種血清型可引起性病淋巴肉芽腫。泌尿生殖道疾病如女性的宮頸炎、盆腔炎、子宮內(nèi)膜炎、男性的附睪炎、兩性的尿道炎、直腸炎均可由沙眼衣原體引起。

             

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