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紫外分光光度計(jì)的使用步驟
使用方法：開機(jī)步驟
1 開光譜儀電源
2 開計(jì)算機(jī)電源
3 在文件管理器中用鼠標(biāo)指按UV WinLab圖標(biāo),此時(shí)出現(xiàn)UV WinLab的應(yīng)用窗口,儀器已準(zhǔn)備好,可選用適當(dāng)方法進(jìn)行分析操作.
2 方法：在分析中必須對分光光度計(jì)設(shè)定一些必要的參數(shù),這些參數(shù)的組合就形成一個(gè)“方法”.Lambda系列UV WinLab軟件預(yù)設(shè)四類常用方法.
1）掃描（SCAN）,用以進(jìn)行光譜掃描.
2）時(shí)間驅(qū)動（TIME DRIVER）,用以觀察一定時(shí)間內(nèi)某種特定波長處縱坐標(biāo)值的變化,如酶動力學(xué).
3）波長編程（WP）用以在多個(gè)波長下測定樣品在一定時(shí)間內(nèi)的縱坐標(biāo)值變化,并可以計(jì)算這些縱坐標(biāo)值的差或比值.
4）濃度（CONC）用以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并測定濃度.
2.1 進(jìn)入所需方法,在方法窗口中選擇所需方法的文件名.
2.2 方法的設(shè)定
2.2.1 掃描、波長編程及時(shí)間驅(qū)動
各項(xiàng)方法可根據(jù)顯示的參數(shù)表,逐項(xiàng)按需要選用或填入,并可參考提示.
2.2.2 濃度
濃度方法窗口下方標(biāo)簽較多,說明做濃度測定時(shí)需要參數(shù)較多.用鼠標(biāo)指按每一標(biāo)簽,可翻出下頁,其上有一些需要測定的參數(shù).必須逐頁設(shè)定.
3 工具條
3.1 SETUP
當(dāng)所需的各項(xiàng)參數(shù)都已在參數(shù)中設(shè)好后,必須用鼠標(biāo)指按SETUP,才能將儀器調(diào)整到所設(shè)狀態(tài).
3.2 AUTOZERO
用鼠標(biāo)指按此鍵,分光光度計(jì)即進(jìn)行調(diào)零（在光譜掃描中則進(jìn)行基線校正）.
3.3 START
用鼠標(biāo)指按此鍵,光度計(jì)即開始運(yùn)行所設(shè)定的方法.
4 方法運(yùn)行
4.1 掃描,時(shí)間驅(qū)動,波長編程
方法選好后,先放入?yún)⒈热芤?按AUTOZERO鍵,進(jìn)行自自動校零或背景校正結(jié)束后再放入樣品,按START,分光光度計(jì)即開始進(jìn)行,同時(shí)屏幕上出現(xiàn)圖形窗口,將結(jié)果顯示出來.
4.2 濃度
4.2.1制訂標(biāo)準(zhǔn)曲線
1 方法選好后,確認(rèn)各項(xiàng)數(shù)據(jù)正確,特別是REFS頁中*行要選中右上角的“edit mode”.再放入?yún)⒈热芤?按AUTOZERO鍵自動校零或背景校正.
2 按setup,待該圖標(biāo)消失后,再按“start”,按提示依次放入標(biāo)準(zhǔn)色列的各管溶液,每次都按提示進(jìn)行操作.
3 標(biāo)準(zhǔn)色列測定
完畢后,屏幕上出現(xiàn)calibgraphwindow,顯示擬合的標(biāo)準(zhǔn)線,并標(biāo)出各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)管的位置,屏幕下方還有一條Concentration mode的對話框,可以用來修改擬合的曲線類型（按 change calbration）,或修改標(biāo)準(zhǔn)溶液的任何一管（replace）,或取消某一管（delete）,或增加標(biāo)準(zhǔn)溶液管數(shù)（add）.如過已經(jīng)滿意,則按analyse sample鍵,進(jìn)入樣品測定窗口.
4 標(biāo)準(zhǔn)曲線有關(guān)的各項(xiàng)數(shù)據(jù),均在calibresultwindow中,可用鼠標(biāo)將其調(diào)出觀察.其中包括每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的具體數(shù)據(jù),標(biāo)準(zhǔn)曲線的回程方程式,相關(guān)系數(shù),殘差.
4.2.2樣品濃度測定
4.2.2.1剛制定好的標(biāo)準(zhǔn)曲線接著進(jìn)行樣品濃度測定時(shí)
1 只需在concentration mode對話框按analyse sample鍵,進(jìn)入樣品測定窗口.
2 按設(shè)定的樣品順序放入各樣品管,每次按提示進(jìn)行操作.
3 屏幕上出現(xiàn)結(jié)果窗口,結(jié)果數(shù)據(jù)將依次顯示在樣品表中的相應(yīng)位置.
4.2.2.2利用原有的標(biāo)準(zhǔn)曲線接著進(jìn)行樣品濃度測定時(shí)
4.2.2.2.1 調(diào)出所測定樣品的濃度方法文件,首先調(diào)出refs頁,將原設(shè)edit mode選項(xiàng)取消,改設(shè)左上角的using exiting
calibration.重新將方法存盤,則今后再調(diào)用時(shí)即不需再作修改.
4.2.2.2.2 在sample頁中按要求重設(shè)各種樣品名稱機(jī)樣品信息.
4.2.2.2.3 按工具條中setup鍵,將主機(jī)設(shè)到該方法所設(shè)定的條件.
4.2.2.2.4 將參比溶液放入比色室,按autozero鍵做背景校零.
4.2.2.2.5 按start鍵,按設(shè)定的樣品順序放入各樣品管,每次按提示進(jìn)行操作.
4.2.2.2.6 屏幕上出現(xiàn)結(jié)果窗口,結(jié)果數(shù)據(jù)將依次顯示在樣品表中相應(yīng)位置.