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            目錄:上海索寶生物科技有限公司>>生化試劑>>實(shí)驗室自產(chǎn)產(chǎn)品>> R0030-100ml非變性組織/細(xì)胞裂解液 R0030 索萊寶

            非變性組織/細(xì)胞裂解液 R0030 索萊寶
            • 非變性組織/細(xì)胞裂解液  R0030 索萊寶
            參考價200
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

            參考價:¥ 200

            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            • SOLARBIO/索萊寶 品牌
            • R0030-100ml 型號
            • 經(jīng)銷商 廠商性質(zhì)
            • 上海市 所在地
            規(guī)格

            100ml

            屬性

            供貨周期:一周 規(guī)格:100ml 貨號:R0030-100ml 應(yīng)用領(lǐng)域:環(huán)保,化工,農(nóng)業(yè),能源,綜合 主要用途:科研

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            規(guī)格
            100ml200元9999瓶可售

            更新時間:2023-10-19 10:59:59瀏覽次數(shù):1575評價

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            供貨周期 一周 規(guī)格 100ml
            貨號 R0030-100ml 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,農(nóng)業(yè),能源,綜合
            主要用途 科研
            非變性組織/細(xì)胞裂解緩沖液內(nèi)含非離子型去垢劑,能裂解細(xì)胞并在非變性條件下釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非變性條件下的裂解蛋白產(chǎn)物最大限度地保留了蛋白的特性和功能,如抗原-抗體結(jié)合或酶學(xué)活性,因此適宜于進(jìn)行免疫共沉淀。另外,有些抗體對非變性蛋白具有更高的結(jié)合能力或只能識別非變性蛋白的抗原位點(diǎn),這種情況應(yīng)該使用非變性裂解。

            非變性組織/細(xì)胞裂解液  R0030 索萊寶

            產(chǎn)品簡介

            英文名稱Native lysis Buffer
            儲存條件附件PMSF-20℃,裂解液2-8℃。有效期1年
            規(guī)格100ml
            單位

            非變性組織/細(xì)胞裂解緩沖液內(nèi)含非離子型去垢劑,能裂解細(xì)胞并在非變性條件下釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非變性條件下的裂解蛋白產(chǎn)物最大限度地保留了蛋白的特性和功能,如抗原-抗體結(jié)合或酶學(xué)活性,因此適宜于進(jìn)行免疫共沉淀。另外,有些抗體對非變性蛋白具有更高的結(jié)合能力或只能識別非變性蛋白的抗原位點(diǎn),這種情況應(yīng)該使用非變性裂解。


            使用說明

            根據(jù)使用量,取每 1ml 裂解液加入 10ul PMSF,使 PMSF 的最終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

            1、樣品前處理:

            a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔加入 150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,冰上放置裂解 5-10 分鐘。

            b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液,冰上放置裂解 5-10 分鐘。期間可以用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

            c)對于組織樣品剪成切成細(xì)小的碎片。按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)  。  用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

            2、后處理:

            充分裂解后,將裂解后的樣品 10000-14000g 離心3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、Western 和免疫沉淀、免疫共沉淀等操作。

            注意事項:

            為取得最佳的使用效果,盡量避免過多的反復(fù)凍融??梢赃m當(dāng)分裝后使用。裂解樣品的所有步驟都需在冰上或 4℃進(jìn)行。裂解時間可根據(jù)實(shí)驗要求進(jìn)行優(yōu)化處理。

            非變性蛋白裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用 BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的 Triton X-100 等干擾物質(zhì),不能用 Bradford 法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。

            為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

            備注:
            以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗證, 僅供參考。
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