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公司動(dòng)態(tài)
膠體
閱讀：335 發(fā)布時(shí)間：2010-11-23電泳的高解析力使其成為生化技術(shù)中zui有效力的一門(mén)分析利器，以下簡(jiǎn)略說(shuō)明各種電泳的形式及其應(yīng)用。
a. 不連續(xù)膠體電泳 （disc-PAGE） 是以原態(tài)蛋白質(zhì)進(jìn)行電泳，一般用作純度檢定或活性分析，SDS-膠體電泳 （SDS-PAGE） 則用為次體分子量的測(cè)定，梯度（gradient） 電泳則可輔助原態(tài)蛋白質(zhì)分子量的決定。 結(jié)合SDS及梯度兩種特性的SDS-梯度膠體電泳，其解析力zui高。
b. 電泳形式 早期使用圓柱狀，演變成直立式的平板膠片 （16×18 cm），zui后改成迷你電泳膠片 （8×10 cm），電泳時(shí)間只約一小時(shí)，而其解析力不變?，F(xiàn)在柱狀電泳只用在等電焦集法，以進(jìn)行二次元電泳；而大型平板電泳則多用在制備式電泳，一般電泳大多以迷你膠片進(jìn)行的。
c. 材質(zhì) 的種類很多，但用在蛋白質(zhì)者則以聚丙烯酰胺 （polyacrylamide） 為主；聚丙烯酰胺電泳是蛋白質(zhì)應(yīng)用zui廣的電泳分析方式。也有少數(shù)使用洋菜 （agarose gel），多用在測(cè)定pI較廣的異構(gòu)酶酶群。
d. 泳動(dòng)率： 在pH 8.8 的電泳條件下，大部分pI 小于8.8 的分子均能往正極泳動(dòng)；蛋白質(zhì)的泳動(dòng)率與所帶電荷成正比，而與其分子量成反比；若分子量一樣，但形狀越不規(guī)則，或體積越松散者，泳動(dòng)率越小。
e. 聚丙烯酰胺電泳 雖然分有原態(tài)的disc-及變性的SDS-PAGE 兩種，但兩者除了SDS-PAGE 在整個(gè)系統(tǒng)含有0.1% SDS 的外，其余*相同，且其鑄膠及電泳方法均屬大同小異。
f. 原態(tài)disc-PAGE 中的樣本蛋白質(zhì)，因電泳系統(tǒng)中不含界面活性劑SDS，其活性多能保持，可以在上做活性染色。 若目標(biāo)酶沒(méi)有方便的活性染色法，則可把一片一片切下，做每一片的活性測(cè)定。