前言
近年來(lái) ，關(guān)于食品或飼料中展青霉素超標(biāo)的事件時(shí)有報(bào)道。2017年8月，我國(guó)香港食品安全中心曾發(fā)布一批受展青霉素污染的瓶裝果汁飲品的食物警報(bào)，指出樣本中的展青霉素含量超標(biāo)。2020年5月，澳超市果汁疑遭受展青霉素污染！
展青霉素又稱展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素，是一種具有極強(qiáng)毒性的真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定, 耐高溫, 因此也易于在加工和儲(chǔ)存過(guò)程中存活。毒理學(xué)試驗(yàn)表明，展青霉素具有影響生育、致癌和免疫等毒理作用，同時(shí)也是一種神經(jīng)毒素。展青霉素具有致畸性，對(duì)人體的危害很大，導(dǎo)致呼吸和泌尿等系統(tǒng)的損害，使人神經(jīng)麻痹、肺水腫、腎功能衰竭。
研究表明，在霉?fàn)€的杏、李、桃、梨、香蕉、菠蘿、青梅、蜜瓜、番茄、櫻桃、辣椒、葡萄、柿子等食品中均有發(fā)現(xiàn)展青霉素，但其主要存在于霉?fàn)€蘋果及其制品中，霉菌經(jīng)氣孔或表面?zhèn)谇秩胩O果表皮并在適合條件下繁殖，進(jìn)一步侵染到周圍的健康果肉組織。
由國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布了GB5009.185—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中展青霉素的測(cè)定》，并于2017年6月23日正式實(shí)施。
本應(yīng)用介紹了賽里安儀器利用液相色譜法對(duì)展青霉素的定量定性分析，方法中使用了裝有C18反相色譜柱并配備超高靈敏度二極管陣列檢測(cè)器（DAD）的賽里安LC6000, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠，且線性良好，儀器運(yùn)行穩(wěn)定，靈敏度高。
1．實(shí)驗(yàn)部分
儀器
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采用包含以下模塊的賽里安LC6000超高效液相色譜儀系統(tǒng)：
● 集成六通道真空脫氣的賽里安 LC6100四元泵
● 賽里安 LC6210 高精度、低殘留自動(dòng)進(jìn)樣器
● 賽里安 LC6320 立式柱溫箱
● 賽里安 LC6430 超高靈敏度二極管陣列檢測(cè)器
液相色譜條件
2. 試劑及標(biāo)準(zhǔn)品
乙腈中展青霉素(編號(hào)：90104a)、乙腈（HPLC級(jí)）
3. 結(jié)果
示例圖譜
展青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液出峰尖銳，詳見圖1。
▲ 圖1 展青霉素示例色譜圖（200ng/ml）
標(biāo)準(zhǔn)曲線
將展青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液依次稀釋為5、10、25、50、100、150、200ng/ml使用外標(biāo)法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)定量 ，以濃度為橫坐標(biāo)峰面積為縱坐標(biāo)作外標(biāo)工作曲線 ；展青霉素響應(yīng)值和濃度呈良好的線性關(guān)系，所得到的相關(guān)系數(shù)為0.9993，詳見圖2。
▲ 圖2 展青霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線
重現(xiàn)性
展青霉素峰面積RSD%=0.85（n=6），保留時(shí)間RSD%=0.05（n=6）；結(jié)果見表2。
4. 結(jié)論
由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，采用賽里安LC6000 UHPLC系統(tǒng)，搭配SCION C18(250mm×4.6mm，5μm)色譜柱和DAD檢測(cè)器，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)展青霉素素的檢測(cè)，靈敏度、穩(wěn)定性、線性均滿足需求。
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