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高效液相色譜柱出現(xiàn)堵塞要怎么辦?

閱讀：8037 發(fā)布時(shí)間：2021-11-3
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　　高效液相色譜柱以乙烯醇共聚物為基質(zhì)的色譜柱，即使其載炭量很高也能保持表面的濕潤(rùn)。多孔結(jié)構(gòu)具有足夠大的平均孔徑，對(duì)小分子化合物、多肽和小分子蛋白能夠產(chǎn)生理想的分離效果。

　　在有機(jī)溶劑比例較高的流動(dòng)相中，該柱具有與硅膠基質(zhì)色譜柱相同的柱效，但在堿性緩沖溶液為流動(dòng)相條件下，其分離效率則超過硅膠色譜柱。顯著的特點(diǎn)之一是基質(zhì)被烷基化的填料的洗脫順序，其保留能力與碳鏈長(zhǎng)度成正比。

　　高效液相色譜柱堵塞要怎么辦?

　　如果是遇到堵塞的情況，先要確定堵塞是由于什么原因引起的，如果是由于色譜柱中殘留的緩沖鹽引起的，這是輕微的堵塞了，可以嘗試用高比例的水相在較高的溫度下沖洗色譜柱。

　　如果是由于樣品原因?qū)е律V柱堵塞，又要考慮另外的辦法，如果是樣品中含有太多吸附性很強(qiáng)的物質(zhì)(有時(shí)是復(fù)雜樣品中的某些雜質(zhì)，無(wú)法通過過濾離心等辦法去除)沉積吸附在柱頭導(dǎo)致堵塞，可以嘗試使用不同的溶劑(對(duì)此類物質(zhì)有較好溶解性的)慢慢沖洗。

　　如果是由于樣品過濾不當(dāng)或者樣品在色譜柱上析出導(dǎo)致某些顆粒雜質(zhì)堵塞了色譜柱，除了嘗試尋找合適溶劑沖洗之外，只能考慮反沖了，通常，不建議反沖色譜柱，因?yàn)榭赡軐?duì)色譜柱造成較大損害，所以反沖是迫不得已的死馬當(dāng)活馬醫(yī)的辦法，一定要慎用。做好樣品的前處理并使用預(yù)柱或在線過濾器才是保護(hù)色譜柱的好辦法!

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