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            牛冠狀病毒抗體ELISA KIT樣本處理方法

            閱讀:1854      發(fā)布時間:2011-6-1
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            牛冠狀病毒抗體ELISA KIT組成:

            30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶
            酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶
            酶標(biāo)包被板 12孔×8條
            樣品稀釋液 6ml×1瓶
            顯色劑A液 6ml×1瓶
            顯色劑B液 6ml×1/瓶
            終止液 6ml×1瓶
            標(biāo)準品(240pg/ml) 0.5ml×1瓶
            標(biāo)準品稀釋液 1.5ml×1瓶
            說明書 1份
            封板膜 2張
            密封袋 1個

            本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中牛冠狀病毒抗體水平。用純化的牛冠狀病毒抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入冠狀病毒抗體,再與HRP標(biāo)記的冠狀病毒抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛冠狀病毒抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準曲線計算樣品中牛冠狀病毒抗體濃度。

            牛冠狀病毒抗體ELISA KIT樣品收集、處理及保存方法:

            1、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
            2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
            3、 細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
            4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
            5、 保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

            牛冠狀病毒抗體ELISA KIT安全性:

            1. 避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
            2. 實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
            3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

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