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            考馬斯亮藍(lán)染色原理

            閱讀:5992      發(fā)布時(shí)間:2019-11-7
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                考馬斯亮藍(lán)染色法也稱考馬斯藍(lán)法(coomassie blue staining)又稱Bradford法。是測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。由于其突出的優(yōu)點(diǎn),正得到越來越廣泛的應(yīng)用。

             

            下面就著重介紹下考馬斯亮藍(lán)染色法原理。

             

                考馬斯亮藍(lán)染色是測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。在游離狀態(tài)下呈紅色,大光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌鞍踪|(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有大光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。

             

                蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G-250結(jié)合在2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。該法是1976年Bradford建立,試劑配制簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便快捷,反應(yīng)非常靈敏,靈敏度比Lowry法還高4倍,可測(cè)定微克級(jí)蛋白質(zhì)含量,測(cè)定蛋白質(zhì)濃度范圍為0~1 000μg/mL,小可測(cè)2.5μg/mL蛋白質(zhì),是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測(cè)定方法。

               

                考馬斯亮藍(lán)分為R-150、R-250、R-350、G-250等。其中R-350為靈敏,R為紅藍(lán)色,G為綠藍(lán)色。索萊寶是專業(yè)生化試劑供應(yīng)商。提供考馬斯R-250、G-250等染色液,常備現(xiàn)貨。

             

                  G-250                                  R-250

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