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            ELISA試劑盒新手入門的使用說明技巧

            閱讀:1315      發(fā)布時間:2015-4-30
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            方法原理
              1.雙抗體()夾心法:檢測抗原()的常見方法,應(yīng)用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測溶液中的抗原(適用于二價以上抗原,不能測 小分子半抗原)。
              2.間接法:檢測抗體的方法,利用酶標(biāo)記的抗抗體(第二抗體)檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體。
              3.競爭法:檢測抗原或小分子半抗原、抗體,以測抗原為例,使待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,結(jié)果如待測抗原含量越多,與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少,顯色越淺,二者呈負(fù)相關(guān)。
            ◎操作注意
              使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
              洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
              底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
            ELISA試劑盒質(zhì)控分析
              1.人員培訓(xùn)內(nèi)容包括:①檢驗(yàn)項目的基本原理(ELISA試劑盒原理);②熟悉檢測技巧,了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點(diǎn);熟悉檢測試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);③熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識;④某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。
              2.基本了解
                1971Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)發(fā)展為ELISA試劑盒技術(shù)。
                特點(diǎn):ELISA試劑盒在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"。
                酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì),進(jìn)行信號放大;
                有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程;
                靈敏度特異性相對較高。
                局限性:只能檢測到ng水平
                精密度差(批內(nèi)CV15-20%);

             ATG16A  整合素αVβ1抗體
             ATG18/WIPI1  整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體
             ATG3  整合素αL抗體
             ATG4A  整合素αE抗體
             ATG4C  整合素α7抗體
             ATG4D  整合素α6抗體
             ATG7  整合素α5抗體
             ATG8/GABARAPL2  整合素α4抗體
             ATG9A  整合素α4β7抗體
             ATG9B  整合素α3抗體
             ATGL/PEDFR  整合素α3β1抗體
             ATH III  整合素α2抗體
             ATM  整合素α1抗體
             ATP citrate lyase  整合素alpha E2 抗體
             ATP1b2/Na+K+ATPase  真核延伸因子激酶2抗體
             ATP2c1  真核啟動因子2α抗體
             ATP4B  真核翻譯延長因子2抗體
             ATP5J  真核翻譯起始因子4G抗體
             ATP7A  真核翻譯起始因子4E抗體
             ATP7B  真核翻譯起始因子4B抗體
             ATRN  真核翻譯起始因子3H抗體
             ATXN1  真核翻譯起始因子3F抗體
             AU1 tag  真核翻譯起始因子3A抗體
             AU5 tag  粘著斑激酶抗體
             Aurora A/ARK-1  粘膜血管定居因子抗體
             Aurora A/B/C  粘膜相關(guān)上皮趨化因子28抗體
             Aurora B/STK-1  粘附相關(guān)激酶抗體
             Aurora C  粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體
             AVEN  粘蛋白-5B抗體
             AVPR2  粘蛋白-4抗體
             Axin1  粘蛋白-3抗體
             AXL  粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗體
             B7-1/CD80  粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體
             B7-DC/CD273  增殖細(xì)胞核抗原抗體
             B7-H1/CD274  增殖細(xì)胞核抗原抗體
             B7H4  增殖細(xì)胞核抗原抗體
             BAAT  增殖細(xì)胞核抗原抗體
            ELISA試劑盒 BACE1/ASP2  增殖潛能相關(guān)蛋白抗體
             BACH1/BRIP1  增食欲素-A/欲激素A
             Bad  增生肉蛋白1抗體
             Bad  造血細(xì)胞磷酸酶抗體
             BADH2  造血細(xì)胞激酶抗體


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