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            溴代十六烷基*胺(CTAB)的使用方法

            閱讀:3544      發(fā)布時(shí)間:2016-7-12
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            溴代十六烷基*胺(CTAB)的使用方法

            溴代十六烷基*胺簡(jiǎn)稱: CTAB,英文名稱Cetyltrimethylammonium bromide, 又稱鯨蠟烷*基溴化銨,十六烷基*基溴化銨,白色粉末狀,是一種季銨鹽溶于水,在酸性溶液中保持穩(wěn)定。是一種陽(yáng)離子去垢劑,用于從大量產(chǎn)生粘多糖的有機(jī)體如植物以及某些革蘭氏陰性菌(包括E.coli的某些株)中制備純化DNA 。

            CTAB結(jié)構(gòu)式

            原理:CTAB是一種陽(yáng)離子去污劑,具有從低離子強(qiáng)度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性,在這種條件下,蛋白質(zhì)和中性多聚糖仍留在溶液里,在高離子強(qiáng)度的溶液里,能夠與蛋白質(zhì)和大多數(shù)酸性多聚糖以外的多聚糖形成復(fù)合物,只是不能沉淀核酸,從而將核酸分離出來(lái)。

            使用方法:

            1.提取DNA配方:

            CTAB 4g

            NaCl 16.364 g

            1M Tris-HCl 20 mL( PH8.0)

            冷卻后0.2-1%(400ul)氯仿-異戊醇(24:1):先加96ml氯仿,再加4ml異戊醇,搖勻即可。

            2.提取RNA配方

            2% CTAB(W/V)

            2%聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)

            100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC處理的水配制)

            25mM EDTA

            由于在高溫滅菌條件下,Tris-HCl要和DEPC發(fā)生反應(yīng),所以配RNA提取緩沖液時(shí)直接用DEPC 處理的水

            使用注意事項(xiàng):CTAB有毒,半數(shù)致死量(大鼠,靜脈)44mg/kg。具有刺激性,若吸入、攝入或皮膚吸收,會(huì)對(duì)人體有害。使用時(shí)要戴合適的手套和防護(hù)眼鏡(或在通風(fēng)櫥操作),避免吸入其粉塵

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