目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC2045-100T/48Sβ-淀粉*活性檢測試劑盒 微量法
| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
| 貨號 | BC2045 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合 |
| 主要用途 | 測定意義：淀粉*責(zé)水解淀粉,主要包括α-淀粉*和β-淀粉*。β-淀粉*(EC |
β-淀粉*（
β-AL）活性檢測試劑盒說明書（DNS顯色法）
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC2045
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體35 mL×1瓶 | 常溫保存 |
| 試劑二 | 液體10 mL×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 粉劑×2支 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑一：若有黃色晶體析出，需加熱溶解后再用；
試劑二：臨用前取取1支試劑三加入到1瓶試劑二中，置于常溫水中并加熱至煮沸，期間不斷攪拌粉劑至溶解，用不完的試劑2-8℃保存4周；
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg無水*萄糖。臨用前加入1 mL蒸餾水配制成10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，2-8℃保存兩周。
產(chǎn)品說明：
淀粉*負(fù)責(zé)水解淀粉，主要包括α-淀粉*和β-淀粉*。β-淀粉*(EC 3.2.1.2) 從淀粉的非還原端切開α-1,4糖苷鍵，生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。
還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。α-淀粉*不耐酸，β-淀粉*不耐熱。根據(jù)上述特性，鈍化其中之一，就可測出另一種淀粉*的活力。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板/微量玻璃比色皿、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
稱取約0.1g樣本，加入0.8mL蒸餾水，研磨勻漿；將勻漿倒入離心管中，提取液在室溫下放置提取15min，每5min振蕩1次，使其充分提取；6000g，常溫離心10min，取上清液加蒸餾水定容至10mL，搖勻，即淀粉*原液。
吸取上述淀粉*原液1mL，加入4mL蒸餾水，搖勻，即為淀粉*稀釋液，用于（α+β）淀粉*總活力的測定。
二、測定步驟
可見分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長到540nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：將10mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋為0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表：
| 序號 | 稀釋前濃度（mg/mL） | 標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL） | 蒸餾水體積（µL） | 稀釋后濃度（mg/mL） |
| 1 | 10 | 50 | 950 | 0.5 |
| 2 | 0.5 | 200 | 200 | 0.25 |
| 3 | 0.25 | 200 | 200 | 0.125 |
| 4 | 0.125 | 200 | 200 | 0.0625 |
| 5 | 0.0625 | 200 | 200 | 0.03125 |
| 6 | 0.03125 | 200 | 200 | 0.015625 |
| 7 | 0.015625 | 200 | 200 | 0.0078 |
備注：實驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需75µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
取2支EP管分別加入75μL淀粉*原液和淀粉*稀釋液，沸水浴5min，分別作為α-淀粉*對照管和總淀粉*對照管使用。
測定操作表：
| 試劑名稱（μL） | α淀粉*活力測定 | 總淀粉*活力測定 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線測定 | |||||||||
| 對照管 | 測定管 | 對照管 | 測定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | |||||||
| 淀粉*原液 | 75（煮沸） | 75 | - | - | - | - | ||||||
| 蒸餾水 | - | - | - | - | - | 75 | ||||||
| 標(biāo)準(zhǔn)溶液 | - | - | - | - | 75 | - | ||||||
| 置于70℃水浴鍋中準(zhǔn)確反應(yīng)15min，冷卻至室溫 | ||||||||||||
| 淀粉*稀釋液 | - | - | 75（煮沸） | 75 | - | - | ||||||
| 試劑二 | - | 75 | - | 75 | - | - | ||||||
| 置于40℃水浴鍋中準(zhǔn)確保溫5min | ||||||||||||
| 試劑一 | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 | ||||||
| 試劑二 | 75 | - | 75 | - | 75 | 75 | ||||||
混勻，沸水浴10min，取200μL至96孔板或微量玻璃比色皿中，在540nm下測定吸光度，從左到右分別記為A1、A2、A3、A4、A5和A6，計算ΔAα=A2-A1，ΔA總=A4-A3，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A5-A6。每個測定管需設(shè)一個對照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測1-2次。
注意事項：
測定的吸光值大于1.5時，可以對樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后測定。若吸光值過小，可以濃縮淀粉*稀釋液或者淀粉*原液。
參考文獻(xiàn)：
[1] Dziedzoave N T, Graffham A J, Westby A, et al. Influence of variety and growth environment on β-amylase activity of flour from sweet potato (Ipomea batatas)[J]. Food control, 2010, 21(2): 162-165.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0700/BC0705 淀粉含量檢測試劑盒
BC0610/BC0615 α-淀粉*（α-AL）活性檢測試劑盒
BC0430/BC0435 ADPG焦磷酸化酶（AGP）活性檢測試劑盒
β-淀粉*活性檢測試劑盒 微量法 β-淀粉*活性檢測試劑盒 微量法
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
16
化工儀器網(wǎng)