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            目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC2575-100T/48Sα-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

            α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
            • α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
            參考價(jià) 面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            參考價(jià) 面議
            具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
            • 型號(hào) BC2575-100T/48S
            • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
            • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
            • 所在地 北京市
            屬性

            $NV_PropertyInfoName.SubString(0,25)

            >

            更新時(shí)間:2024-04-11 11:13:59瀏覽次數(shù):599評(píng)價(jià)

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            分子量 詳詢 分子式 詳詢
            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/48S
            貨號(hào) BC2575 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合
            主要用途 測(cè)定意義:α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培
            儲(chǔ)存條件
            -20℃
            中文名稱
            α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
            有效期
            6個(gè)月
            單位

            英文名稱
            α-galactosidase(α-GAL) Activity Assay Kit
            別名
            α-半乳糖苷酶試劑盒 α-GAL Kit α-半乳糖苷酶(α-GAL)試劑盒 α-半乳糖苷酶(α-GAL)測(cè)試盒
            檢測(cè)方法
            微量法 Spectrophotometer/Microplate Reade


            α-半乳糖苷酶(α-GAL)活性檢測(cè)試劑盒說明書
            微量法
            注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
            貨號(hào):BC2575
            規(guī)格:100T/48S
            產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
            試劑名稱規(guī)格保存條件
            提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
            試劑一粉劑×2-20℃保存
            試劑二液體4 mL×1瓶2-8℃保存
            試劑三液體15 mL×1瓶2-8℃保存
            標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存
            溶液的配制:
            1、試劑一:臨用前取1支加入1.25 mL蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融(1瓶粉劑溶解后可做100T,為了延長(zhǎng)使用時(shí)間,此產(chǎn)品多給1瓶粉劑);
            2、標(biāo)準(zhǔn)品:5 μmol/mL的對(duì)硝基 苯*溶液。
            產(chǎn)品說明:
            α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,能專一地催化α-半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對(duì)于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要,種子萌發(fā)初期,其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗,為種子的萌發(fā)提供最初的能量來源,后期則主要參與細(xì)胞壁儲(chǔ)藏多糖水解。
            α-GAL分解對(duì)-硝基 苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對(duì)-硝基 苯*,后者在400nm有最大吸收峰,通過測(cè)定吸光值升高速率來計(jì)算α-GAL活性。

            注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
            需自備的儀器和用品:
            可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、超聲破碎儀、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
            操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
            一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
            1細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的處理:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),15000g,4℃,離心20min,取上清,置冰上待測(cè)。
            2、組織的處理:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;15000g4℃,離心20min,取上清,置冰上待測(cè)。
             
            • 測(cè)定步驟

            1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至400nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

            2. 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋:將標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至200、100、50、2512.5、6.25、0nmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。

            3. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表:

            序號(hào)稀釋前濃度(nmol/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(nmol/mL)
            15000801920200
            220010001000100
            31001000100050
            4501000100025
            5251000100012.5
            612.5100010006.25
            76.25010000(空白管)
            備注:實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需70µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
            1. 樣本測(cè)定(在EP管或96孔板中依次加入下列試劑):

            試劑名稱(μL測(cè)定管對(duì)照管標(biāo)準(zhǔn)管
            試劑一25--
            蒸餾水-25-
            試劑二3535-
            樣本 1010-
            迅速混勻,放入37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中準(zhǔn)確反應(yīng)30min
            標(biāo)準(zhǔn)品--70
            試劑三130130130
            充分混勻,室溫靜置2min后,于400nm處測(cè)定吸光值A,分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)1-2。

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