目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC3295-100T/96S結(jié)合態(tài)淀粉合成酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
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更新時(shí)間：2024-04-11 16:44:22瀏覽次數(shù)：561評(píng)價(jià)
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| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
| 貨號(hào) | BC3295 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合 |
| 主要用途 | 測(cè)定意義：GBSS（EC 2.4.1.21）以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的 |
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶（GBSS）活性檢
測(cè)試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC3295
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體110 mL×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體16 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二A | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二B | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
| 試劑二C | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
| 試劑三A | 液體12mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三B | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
| 試劑四 | 液體27μL×1支 | 2-8℃保存 |
| 試劑五A | 液體18mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑五B | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑五C | 粉劑×2支 | 2-8℃保存 |
| 試劑六 | 粉劑×3支 | -20℃保存 |
| 試劑七 | 粉劑×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制：
試劑二：臨用前取1瓶試劑二A加入8mL試劑一，緩慢加熱，逐漸升溫至煮沸使其溶解，冷卻后加入1支試劑二B和1支試劑二C混合溶解，這樣可以分兩批配制并且測(cè)定，用不完的試劑-20℃分裝保存2周，避免反復(fù)凍融。
試劑三：臨用前取1瓶試劑三B加入5mL試劑三A溶解備用，用不完的試劑-20℃分裝保存4周，避免反復(fù)凍融。
試劑四：臨用前先離心，取12.5 μL試劑四加入4 mL溶解好的試劑三混合備用（約53T），現(xiàn)用現(xiàn)配，也可根據(jù)樣本量按比例配制。
試劑五：臨用前取1瓶試劑五B加入8mL試劑五A和1支試劑五C溶解備用，用不完的試劑-20℃分裝保存4周，避免反復(fù)凍融。
試劑六：臨用前取1支加入208 μL蒸餾水充分溶解，用不完的試劑-20℃分裝保存2周，避免反復(fù)凍融。
試劑七：臨用前加入2mL蒸餾水，用不完的試劑-20℃分裝保存8周，避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品說明：
GBSS（EC 2.4.1.21）以束縛態(tài)存在于淀粉體中，催化淀粉鏈的加長(zhǎng)反應(yīng)，主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。
GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上，同時(shí)生成ADP；進(jìn)一步通過反應(yīng)體系中添加的 丙 酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH，其中NADPH生成量與前一步反應(yīng)生成的ADP數(shù)量呈正比，通過340nm下測(cè)定NADPH的增加量，可以計(jì)算GBSS活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
取0.1g肝臟加入1mL提取液，冰浴中勻漿。10000g，4℃離心10min，棄上清，在沉淀中加入1mL提取液充分混勻，置冰上，之后按照測(cè)定步驟操作，用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA=A2-A1=0.2685-0.2532=0.0153，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：
GBSS活性（U/g 質(zhì)量）=43.2×ΔA÷W=6.6096 U/g 質(zhì)量。
取0.1g柳樹加入1mL提取液，冰浴中勻漿。10000g，4℃離心10min，棄上清，在沉淀中加入1mL提取液充分混勻，置冰上，之后按照測(cè)定步驟操作，用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA=A2-A1=2.2252-2.2184=0.0068，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：
GBSS活性（U/g 質(zhì)量）=43.2×ΔA÷W=2.9376 U/g 質(zhì)量。
參考文獻(xiàn)：
Jiang H, Dian W, Wu P. Effect of high temperature on fine structure of amylopectin in rice endosperm by reducing the activity of the starch branching enzyme[J]. Phytochemistry, 2003, 63(1): 53-59.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0700/BC0705 淀粉含量檢測(cè)試劑盒
BC1850/BC1855 可溶性淀粉合成酶（SSS）活性檢測(cè)試劑盒
BC1860/BC1865 淀粉分支酶（SBE）活性檢測(cè)試劑盒
結(jié)合態(tài)淀粉合成酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法 結(jié)合態(tài)淀粉合成酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
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