目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4025-100T/48S土壤亮*酸氨基肽酶活性檢測試劑盒 微量法
| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
| 貨號 | BC4025 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合 |
| 主要用途 | 土壤亮*酸氨基肽酶(S-LAP)活性檢測 |
土壤亮*酸氨基肽酶（S-LAP）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC4025
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑二：臨用前取1瓶加入1.875 mL丙 酮溶解，用不完的試劑2-8℃保存一周。
產(chǎn)品說明：
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮*酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關。
S-LAP分解L-亮*酸對硝基 苯胺生成對硝基 苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、離心機、水浴鍋、研缽、甲苯（不允許快遞）、丙 酮（不允許快遞）、30-50目篩、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
取新鮮土樣自然風干或37℃烘干，過30-50目篩。
二、測定步驟
分光光度計/酶標儀預熱30min以上，波長調(diào)至405nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。
加樣表：
| 測定管 | 對照管 | |
| 風干土樣（g） | 0.03 | 0.03 |
| 甲苯（μL） | 15 | 15 |
| 震蕩混勻，室溫靜置15min。 | ||
| 試劑一（μL） | 255 | 255 |
| 試劑二（μL） | 30 | - |
| 置于30℃水浴鍋準確反應1h后，立刻煮沸5min（蓋緊，纏封口膜，防止崩開水分散失）。流水冷卻至室溫。 | ||
| 試劑二（μL） | - | 30 |
| 14000g，常溫離心10min，取200μL上清于405nm處測定吸光值，分別記為A測定管、A對照管，計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設一個對照管。 | ||
實驗實例：
稱取兩管0.03g三葉草土樣，分別記為測定管和對照管，按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.6-0.17=0.43，計算酶活得：
S-LAP活性（U/g 土樣）=0.844×ΔA÷W=0.844×0.43÷0.03=12.097U/g 土樣。
稱取兩管0.03g土樣，分別記為測定管和對照管，按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.569-0.128=0.441，計算酶活得：
S-LAP活性（U/g 土樣）=0.844×ΔA÷W=0.844×0.441÷0.03=12.407U/g 土樣。
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