目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC4275-100T/96S支鏈淀粉含量檢測試劑盒 微量法
| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
| 貨號 | BC4275 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產業(yè),農林牧漁,綜合 |
| 主要用途 | 支鏈淀粉含量檢測 |
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體100 mL×1瓶（自備） | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體55 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | - | 2-8℃保存 |
| 試劑五 | 液體2 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑六 | 液體10mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標準品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
試劑二：*100 mL自備。
試劑四：提供125 mL空瓶一個；將試劑三：H2O =9 mL：91 mL混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，2-8℃保存半年。
標準品：10 mg支鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的支鏈淀粉，2-8℃保存半年。
稱取0.005g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；
80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測。
分光光度計/酶標儀預熱30min以上，調節(jié)雙波長至530nm和755nm，分光光度計蒸餾水調零。
標準液的稀釋：將10 mg/mL的標準溶液用試劑四稀釋至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.05 mg/mL標準溶液待測。
標準液稀釋可參考下表：
| 序號 | 稀釋前濃度（mg/mL） | 標準液體積（µL） | 試劑四體積（µL） | 稀釋后濃度（mg/mL） |
| 1 | 10 | 100 | 900 | 1 |
| 2 | 1 | 160 | 40 | 0.8 |
| 3 | 1 | 120 | 80 | 0.6 |
| 4 | 1 | 160 | 240 | 0.4 |
| 5 | 0.4 | 200 | 200 | 0.2 |
| 6 | 0.2 | 200 | 200 | 0.1 |
| 7 | 0.1 | 200 | 200 | 0.05 |
操作表：(在1.5mL離心管中或96孔板中依次加入下列試劑)
| 試劑名稱 | 測定管 | 標準管 | 空白管 |
| 樣本（µL） | 40 | - | - |
| 標準溶液（μL） | - | 40 | - |
| 蒸餾水（µL） | - | - | 40 |
| 試劑五（µL） | 15 | 15 | 15 |
| 試劑六（µL） | 10 | 10 | 10 |
| 蒸餾水（µL） | 135 | 135 | 135 |
| 充分混勻，測定530nm和755nm處的吸光值，530nm下的測定管、標準管、空白管分別記為A測定、A標準和A空白，755nm下的分別記為A’測定、A’標準、A’空白，計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白），ΔA標準=（A標準-A空白）-（A’標準-A’空白）。標準曲線和空白管只需測定1-2次。 | |||
標準曲線的建立
支鏈淀粉含量（mg/g 質量）=x×V樣總÷W=5x÷W
反應后建議在20min內檢測完成防止褪色。
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。注意同步修改計算公式。
取0.01g大米于研缽中研碎，加入1mL試劑一，進行樣本處理，取上清3倍稀釋后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白）=（0.351-0.059）-（0.190-0.048）=0.150，帶入標準曲線y=0.5157x+0.0089計算x=0.2736，按樣本質量計算含量得：
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