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| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
| 貨號 | BC4445 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合 |
| 主要用途 | 半纖維素含量檢測 |
半纖維素含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC4445
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液一 | 液體60 mL×1瓶 | 常溫保存 |
提取液二 | 液體60 mL×1瓶 | 常溫保存 |
試劑一 | 液體100 mL×1瓶（自備） | 2-8℃保存 |
試劑二 | 2-8℃保存 | |
標準品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 試劑一：80%乙醇自備；
2、 標準品：10 mg D-木糖。臨用前加入1 mL蒸餾水溶解配制成10 mg/mL的標準溶液。2-8℃保存4周。
產(chǎn)品說明：
半纖維素是指在植物細胞壁中與纖維素共生、可溶于堿溶液，遇酸后遠較纖維素易于水解的那部分植物多糖，廣泛存在于植物中，其分布因植物種屬、成熟程度、早晚材、細胞類型及其形態(tài)學(xué)部位的不同而有很大差異。一種植物往往含有幾種由兩或三種糖基構(gòu)成的半纖維素，其化學(xué)結(jié)構(gòu)各不相同。半纖維素是一種新型的可利用能源。
半纖維素在一定條件下水解為還原性糖類，還原糖在堿性條件下與3，5-二硝基水楊酸（DNS）加熱被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物，DNS則被還原為棕紅色3-氨基-5-硝基水楊酸，在540nm處具有特征吸收峰，通過吸光值的變化即可定量檢測半纖維素的含量。
低檢出限：0.1516 mg/mL
線性范圍：0.2-1 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
天平、可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、恒溫水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、30~50目篩、蒸餾水、EP管。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
樣本自然風(fēng)干或用烘箱烘干至恒重，研缽充分研磨后，過30~50目篩。
二、測定步驟
1、 分光光度計/酶標儀預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長至540 nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。
2、 標準液的稀釋：將10 mg/mL的標準溶液用蒸餾水稀釋至1、0.9、0.8、0.6、0.4、0.2 mg/mL標準溶液待測。
3、 標準液稀釋可參考下表：
序號 | 稀釋前濃度（mg/mL） | 標準液體積（µL） | 蒸餾水體積（µL） | 稀釋后濃度（mg/mL） |
1 | 10 | 50 | 450 | 1 |
2 | 1 | 180 | 20 | 0.9 |
3 | 1 | 160 | 40 | 0.8 |
4 | 1 | 120 | 80 | 0.6 |
5 | 1 | 80 | 120 | 0.4 |
6 | 1 | 40 | 160 | 0.2 |
備注：實驗中每個標準管需80µL標準溶液。
4、 操作表（在1.5 mL EP管中操作）：
試劑名稱 | 空白管 | 測定管 | 標準管 |
樣本（g） | - | 0.05 | - |
試劑一（μL） | - | 1000 | - |
漩渦混勻，90℃水浴10 min，25℃，8000 g離心10 min，棄上清留沉淀 | |||
蒸餾水（μL） | - | 1000 | - |
漩渦混勻，25℃，8000 g離心10 min，棄上清，此步驟重復(fù)三次，取沉淀，烘干至恒重 | |||
提取液一（μL） | 500 | 500 | - |
90℃水浴1 h，自然冷卻至室溫 | |||
提取液二（μL） | 500 | 500 | - |
漩渦混勻，25℃，8000 g離心10 min，取上清待測 | |||
上清液（μL） | 80 | 80 | - |
標準液（μL） | - | - | 80 |
試劑二（μL） | 80 | 80 | 80 |
蒸餾水（μL） | 160 | 160 | 160 |
漩渦混勻，90℃水浴5 min，自然冷卻至室溫 | |||
取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板中，于540nm測定吸光值A，分別記為A空白、A測定、A標準，計算ΔA標準=A標準-A空白，ΔA測定=A測定-A空白。標準曲線和空白管只需測定1-2次。 | |||
三、半纖維素含量計算
1、標準曲線的繪制：
根據(jù)標準管的濃度（y，mg/mL）和吸光度ΔA標準（x，ΔA標準），建立標準曲線。根據(jù)標準曲線，將ΔA測定（x，ΔA測定）帶入公式計算樣本濃度（y，mg/mL）。
2、半纖維素含量的計算：
半纖維素含量（mg/g 干重）= y× V樣總÷W×F= y÷ W×F
V樣總：加入提取液體積，1 mL；W：樣本質(zhì)量，g；F：稀釋倍數(shù)。
注意事項：
1、如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
2、建議將加入提取液二離心后的上清液稀釋10~20倍后檢測。計算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)。
BC3330/BC3335 糖原合成酶活（GCS）性檢測試劑盒
BC3360/BC3365 UDPG焦磷酸化酶（UGP）活性檢測試劑盒
BC4290/BC4295 N-乙?；?/span>-β-葡萄糖苷酶（NAG）活性檢測試劑盒
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