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            目錄:北京索萊寶科技有限公司>>蛋白質(zhì)研究>>蛋白質(zhì)提取>> BC3710全蛋白提取試劑盒(強)

            全蛋白提取試劑盒(強)
            • 全蛋白提取試劑盒(強)
            參考價 面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            參考價 面議
            具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
            • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
            • 型號 BC3710
            • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
            • 所在地 北京市
            屬性

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            >

            更新時間:2024-08-01 21:46:40瀏覽次數(shù):2003評價

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            供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
            貨號 BC3710 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油
            主要用途 全蛋白提取
            全蛋白提取試劑盒(強)用于哺乳動物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

            全蛋白提取試劑盒(強)

            用于哺乳動物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

            產(chǎn)品組成:

             

             

            規(guī)格

            儲存條件

            裂解液(強)

            100 ml

            2-8 oC

            磷酸酶抑制劑(100x)

            1ml

            -20 oC

            蛋白酶抑制劑(100x)

            1 ml

            PMSF(100x)

            1ml


            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

            操作方法:
            1、組織總蛋白的提取
            在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;稱取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直沒有明顯的組織塊,這個過程注意冰上操作;將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g離心30min;
            吸取上清新的管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)
            2、細(xì)胞總蛋白的提取
            裂解液的用量:107個細(xì)胞需要裂解液1ml;
            貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞,
            將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
            懸浮細(xì)胞:4 oC 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
            渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
            裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min;
            將上清移入新的EP管中;
            進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
            (提取好的蛋白建議保存于-80 oC,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長時間儲存。)

            注意事項:
            實驗過程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過程中的低溫環(huán)境;
            PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因為PMSF在水溶液中會快速降解;

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