產(chǎn)品名稱:：ATP含量測試盒

產(chǎn)品英文名：ATP Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC0300            產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣                      產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：1400
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字：ATP含量測試盒|ATP檢測試劑盒|試劑盒|

簡要介紹：
ATP 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。
    測定ATP 含量并且計(jì)算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。肌酸激酶催化肌酸和ATP 反應(yīng)生成磷酸肌酸，可在700nm 下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量，以此反應(yīng)ATP 含量。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：

產(chǎn)品說明：
     三磷酸腺苷（adenosine 5'-triphosphate，ATP）是生物體內(nèi)能量轉(zhuǎn)換基本的載體, 其含量的變化直接關(guān)系到各器官的能量代謝。ATP作為重要的能量分子在細(xì)胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變，會影響許多細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下，ATP水平會下降，而高葡萄糖刺激等對于一些細(xì)胞可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降，在細(xì)胞凋亡時(shí)ATP水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時(shí)發(fā)生狀態(tài)。ATP含量測定試劑盒可以用于檢測紅細(xì)胞或組織內(nèi)的ATP水平。
自備儀器和用品：
分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、臺式離心機(jī)、研缽和蒸餾水。
操作步驟：

• 樣本前處理：
• 紅細(xì)胞：抗凝全血取下層積壓紅細(xì)胞，一般按1:4的體積比加雙蒸水進(jìn)行稀釋，再混勻使溶血*，制備成溶血液。將制好的溶血液加入玻璃試管中沸水加熱煮10分鐘，取出混勻抽提1分鐘，4000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液待測。
• 組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重，按質(zhì)量（g）：體積(mL)為1：9的比例加入9倍體積的沸雙蒸水，制成10%的勻漿液，再置于沸水中煮10min，取出混勻抽提1min，3500轉(zhuǎn)/分鐘，離心10min，取上清液待測。
• 培養(yǎng)細(xì)胞：先離心處理將細(xì)胞和培養(yǎng)上清分離，棄上清，得到下層沉淀細(xì)胞（一般細(xì)胞數(shù)量達(dá)到10⁶ 個(gè)），將收集好的細(xì)胞加入300-500μL的熱雙蒸水，置于熱水?。?0-100℃）中勻漿破碎后，將細(xì)胞懸液于沸水浴中加熱10min，取出混勻抽提1min（渦旋混勻），即可用于測定。（如果存在大塊細(xì)胞碎片，需離心后取上清測定）

二、操作步驟

混勻，室溫靜置5min，波長636nm，光徑0.5cm，雙蒸水調(diào)零，測定各管吸光值。
注意：在比色前比色皿用自來水洗10次，再用蒸餾水洗4-5次，以免磷污染。
如果樣本量大，建議將試劑混合后再按照該表操作
1混合試劑配制：
工作液A：按試劑一：試劑二：試劑三=100:200:30的比例配制，現(xiàn)用現(xiàn)配，按需配制。
工作液B：按試劑一：試劑二=100:200的比例配制，現(xiàn)用現(xiàn)配，按需配制。
2、試劑配好后按下表操作：

混勻，室溫靜置5min，波長636nm，光徑0.5cm，雙蒸水調(diào)零，測定各管吸光值。
注意：在比色前比色皿用自來水洗10次，再用蒸餾水洗4-5次，以免磷污染。
ATP 含量計(jì)算：

1. 紅細(xì)胞中ATP 含量計(jì)算

ATP 含量(μmol/gHb)=[ (A 測定管-A 對照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白)] ×標(biāo)準(zhǔn)品濃度（1×10³μmol/L）×樣本測定前稀釋倍數(shù)÷血紅蛋白濃度（gHb/L ) 

1. 組織、細(xì)胞中ATP 含量計(jì)算
2. ATP 含量(μmol/gprot)=[ (A 測定管-A 對照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白)] ×標(biāo)準(zhǔn)品濃度（1×10³μmol/L）×樣本測定前稀釋倍數(shù)÷待測樣本蛋白濃度（gprot/L ) 

注意：
1.要求不能有任何磷污染，建議用一次性塑料試管。
2.顯色應(yīng)用液配好后，不可放置太久，一般可保存5天，現(xiàn)配現(xiàn)用。
3.組織勻漿宜用2%-5%濃度的勻漿上清，若樣本濃度過高，則底色過深（對照管OD過高），需稀釋測定，一般通過預(yù)實(shí)驗(yàn)將對照OD值控制在1.0以下。