糖原含量檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品名稱: 糖原含量檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名: Micro Glucogen Content Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC0345     產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣         產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：340
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:   糖原檢測(cè)試劑盒|糖原含量檢測(cè)試劑盒|糖原|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖，是糖的主要的儲(chǔ)存形式之一，主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量，分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度，當(dāng)血糖升高時(shí)可在肝臟合成糖原，血糖降低時(shí)，肝糖原則分解為葡萄糖以補(bǔ)充血糖。因此，肝糖原對(duì)維持血糖的相對(duì)平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲(chǔ)存形式,在劇烈運(yùn)動(dòng)消耗大量血糖時(shí)，肌糖原不能直接分解成血糖，必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過(guò)糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
    提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
    試劑一：0.1mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液10mL×1瓶，4℃保存；
    試劑二：粉劑×1瓶， 4℃保存；
產(chǎn)品說(shuō)明：
糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖，是糖的主要的儲(chǔ)存形式之一，主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量，分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度，當(dāng)血糖升高時(shí)可在肝臟合成糖原，血糖降低時(shí)，肝糖原則分解為葡萄糖以補(bǔ)充血糖。因此，肝糖原對(duì)維持血糖的相對(duì)平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲(chǔ)存形式,在劇烈運(yùn)動(dòng)消耗大量血糖時(shí)，肌糖原不能直接分解成血糖，必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過(guò)糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>
測(cè)定原理：蒽酮法。利用強(qiáng)堿性提取液提取糖原，在強(qiáng)酸性條件下利用蒽酮顯色劑測(cè)定糖原含量。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量比色皿/96 孔板、濃硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：

• 糖原提?。?/span>

1﹑細(xì)胞或細(xì)菌：收集500~1000 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；加入0.75mL 提取液超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30 次）；轉(zhuǎn)移10mL 試管中，置于沸水浴中煮沸20min（蓋緊，防止水分散失），隔5min 振搖試管1 次，使充分混勻；取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5mL，混勻，待測(cè)。
2﹑組織：稱取0.1~0.2g 樣品，置于10mL試管中；加入0.75mL提取液，置于沸水浴中煮沸20min（蓋緊，防止水分散失），隔5min 振搖試管1 次，使充分混勻；待組織全部溶解后，取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5mL，混勻，待測(cè)。

• 步驟和加樣表
• 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)620nm，蒸餾水調(diào)零。調(diào)節(jié)水浴鍋95℃。
• 在試劑二中倒入6mL 蒸餾水，緩慢倒入24mL 濃硫酸，充分溶解混勻后使用。4℃有效期一周。
• 加樣表（在EP 管中反應(yīng)）：

混勻，置沸水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻，于620nm 波長(zhǎng)處，分別讀取空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管吸光度，分別記為A1、A2 和A3。
注意：1、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要測(cè)一次。
      2、如果A3-A1 大于2，需要將樣本用蒸餾水稀釋，計(jì)算公式中乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

• 糖原含量的計(jì)算：
• 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

糖原（mg/g 鮮重）=1.11×(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷W

1. 按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

糖原(mg/mg prot)=1.11×(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷（A2-A1) ÷Cpr
3、按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
糖原（mg/10⁴ cell）=1.11×(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量×V1÷V2)
                 = 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
    1.11：是此法測(cè)得葡萄糖含量換算為糖原含量的常數(shù)，即111μg 糖原用蒽酮試劑顯色相當(dāng)于100μg 葡萄糖用蒽酮所試劑顯示的顏色；C 標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.1mg/mL；V1：加入反應(yīng)體系中糖原提取液體積，0.25mL；V2：提取液體積，5mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量：以10⁴為單位，萬(wàn)個(gè)。


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