β-1,3葡聚糖酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品名稱: β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)活性檢測(cè)試劑盒  微量法

產(chǎn)品英文名:  Micro β-1,3-glucanase （β-1,3-GA）Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC0365     產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：1400
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: 葡聚糖酶檢測(cè)試劑盒|β-1,3-GA檢測(cè)試劑盒|葡聚糖酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下，可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性測(cè)定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵，產(chǎn)生還原末端，通過測(cè)定還原糖生成速率，來計(jì)算其酶活性。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入3.5mL雙蒸水，充分溶解待用；
    試劑二：液體30mL×1瓶，4℃保存；
    標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1支，4℃保存，含10mg無水葡萄糖（干燥失重<0.2%），臨用前加入1ml蒸餾水溶解，配制成10mg/ml葡萄糖溶液備用，4℃可保存1周，或者用飽和苯甲酸溶液溶解，可保存更長(zhǎng)時(shí)間。
標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。
產(chǎn)品說明：
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下，可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA 活性測(cè)定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA 水解昆布多糖，內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵，產(chǎn)生還原末端，通過測(cè)定還原糖生成速率，來計(jì)算其酶活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
稱取約0.2g組織，剪碎，放入預(yù)冷的研缽中，加入1.0 mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿，12000g，4℃，離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)540nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 樣本測(cè)定（在1.5mL EP 管中依次加入下列試劑）：

充分混勻，沸水浴5min（蓋緊，防止水分散失），流水冷卻，540nm 處記錄各管吸光值A，
如果吸光值大于2，可以用提取液對(duì)樣本稀釋后測(cè)定（計(jì)算公式乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)），ΔA=A 測(cè)定-A對(duì)照。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
三、β-1,3-GA 活性計(jì)算：
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管吸光度x（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）和濃度（y，mg/mL）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，將ΔA帶入公式中計(jì)算出樣品中產(chǎn)生的還原糖的含量y值（mg/mL）

1. 按蛋白濃度計(jì)算

單位的定義：每mg 組織蛋白每小時(shí)產(chǎn)生1mg 還原糖定義為一個(gè)酶活性單位。
β-1,3-GA(U/mg prot)=(y×V1)÷(V1×Cpr)=y ÷Cpr

2. 按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義：每g 組織每小時(shí)產(chǎn)生1mg 還原糖定義為一個(gè)酶活性單位。
β-1,3-GA(U/g 鮮重)=(y×V1)÷(W×V1÷V2)=y ÷W
(3) 按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)胞或細(xì)菌每小時(shí)產(chǎn)生1mg 還原糖定義為一個(gè)酶活性單位。
β-1,3-GA(U/10⁴ cell)=( y×V1)÷(500×V1÷V2)=0.002×y
V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，萬。
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相關(guān)文獻(xiàn)：
《The antifungal activity of a thaumatin-like protein from oyster Crassostrea gigas》 作者:X Niu,Q Xu,W Wang,Z Yu,Z Liu,C Qu,Y Liu,C Gong,L Wang,L Song 期刊:Invertebrate Survival Journal 影響因子:0.967 PMID:






 

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