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            上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

            牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)ELISA實(shí)驗(yàn)原理

            時(shí)間:2011-10-18閱讀:1081
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            牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)ELISA實(shí)驗(yàn)原理

            本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測定牛血清,血漿及相關(guān)液體樣本中偽狂犬病抗原(PRV Ag)水平。

            實(shí)驗(yàn)原理:

              本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標(biāo)本中偽狂犬病抗原PRV Ag。用純化的偽狂犬病抗原(PRV Ag)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中偽狂犬病抗原(PRV Ag)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的偽狂犬病抗原(PRV Ag)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)的存在與否。

             

            試劑盒組成

            試劑盒組成

            48孔配置

            96孔配置

            保存

            說明書

            1

            1

             

            封板膜

            2片(48

            2片(96

             

            密封袋

            1個(gè)

            1個(gè)

             

            酶標(biāo)包被板

            1×48

            1×96

            2-8℃保存

            陰性對照

            0.5ml×1

            0.5ml×1

            2-8℃保存

            陽性對照

            0.5ml×1

            0.5ml×1

            2-8℃保存

            酶標(biāo)試劑

            3 ml×1

            6 ml×1

            2-8℃保存

            樣品稀釋液

            3 ml×1

            6 ml×1

            2-8℃保存

            顯色劑A

            3 ml×1

            6 ml×1

            2-8℃保存

            顯色劑B

            3 ml×1

            6 ml×1

            2-8℃保存

            終止液

            3ml×1

            6ml×1

            2-8℃保存

            濃縮洗滌液

            20ml×20倍)×1

            20ml×30倍)×1

            2-8℃保存

             

            結(jié)果判定:

              試驗(yàn)有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

              臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

              陰性判定:樣品OD< 臨界值(CUT OFF)者為偽狂犬病抗原(PRV Ag)陰性

              陽性判定:樣品OD臨界值(CUT OFF)者為偽狂犬病抗原(PRV Ag)陽性

            注意事項(xiàng)

            1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,本試劑不同批號組分不得混用。

            2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

            3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

            4.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

            5.底物請避光保存。

            6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測時(shí),參考波長為630nm

            7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須注意安全。

             

            保存條件及有效期

            1.試劑盒保存:2-8。

            2.有效期:6個(gè)月

             

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