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            上海研謹生物科技有限公司

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            人巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)定性酶聯免疫elisa

            參  考  價:面議
            具體成交價以合同協議為準

            產品型號48T/96T

            品牌

            廠商性質經銷商

            所在地上海市

            更新時間:2025-01-11 17:32:52瀏覽次數:1108次

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            人巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)定性酶聯免疫elisa價格公道、*,售后服務完整,并提供免費代檢測服務!需要產品說明書及其它詳細信息請直接與我們。

            巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)酶聯免疫分析(ELISA

            試劑盒使用說明書

            本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)水平。

            實驗原理:

               本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯免疫法(ELISA)測定標本中人巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)。用純化的人巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)相結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)的存在與否。

             

            試劑盒組成

            試劑盒組成

            48孔配置

            96孔配置

            保存

            說明書

            1

            1

             

            封板膜

            2片(48

            2片(96

             

            密封袋

            1

            1

             

            酶標包被板

            1×48

            1×96

            2-8℃保存

            陰性對照

            0.5ml×1

            0.5ml×1

            2-8℃保存

            陽性對照

            0.5ml×1

            0.5ml×1

            2-8℃保存

            酶標試劑

            3 ml×1

            6 ml×1

            2-8℃保存

            樣品稀釋液

            3 ml×1

            6 ml×1

            2-8℃保存

            顯色劑A

            3 ml×1

            6 ml×1

            2-8℃保存

            顯色劑B

            3 ml×1

            6 ml×1

            2-8℃保存

            終止液

            3ml×1

            6ml×1

            2-8℃保存

            濃縮洗滌液

            20ml×20倍)×1

            20ml×30倍)×1

            2-8℃保存

             

            樣本處理及要求

            1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

            2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

            3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

            4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

            5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

            6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

            7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

             

            操作步驟:

            1.         編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

            2.         加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

            3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  

            4.         配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用

            5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

            6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

            7.         溫育:操作同3。

            8.         洗滌:操作同5

            9.         顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘

            10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

            11.     測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

             

            結果判定:

              試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

              臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

              陰性判定:樣品OD< 臨界值(CUT OFF)者為人巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)陰性

              陽性判定:樣品OD臨界值(CUT OFF)者為人巨細胞病毒抗體IgG(CMV IgG)陽性

            注意事項

            1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。

            2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

            3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

            4.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

            5.底物請避光保存。

            6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm

            7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。

             

            保存條件及有效期

            1.試劑盒保存:;2-8。

            2.有效期:6個月

             

             

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