濾光片在流式細(xì)胞儀中應(yīng)用
流式細(xì)胞儀是測量染色細(xì)胞標(biāo)記物熒光強度的細(xì)胞分析儀，是在單個細(xì)胞分析和分選基礎(chǔ)上發(fā)展起來的對細(xì)胞的物理或化學(xué)性質(zhì)（如大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等）進行快速測量并可分類收集的高技術(shù)儀器。
流動細(xì)胞儀主要有以下五部分構(gòu)成：
1. 流動室及液流系統(tǒng)
2. 激光源及光學(xué)系統(tǒng)
3. 光電管和檢測系統(tǒng)
4. 計算機和分析系統(tǒng)
流動室及液流系統(tǒng)
流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成，常用光學(xué)玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。樣品管貯放樣品，單個細(xì)胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出；鞘液由鞘液管從四周流向噴孔，包圍在樣品外周后從噴嘴射出。為了保證液流是穩(wěn)液，一般限制液流速度υ<10m/s。
激光源及光學(xué)系統(tǒng)
經(jīng)特異熒光染色的細(xì)胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光；激光器又以氬離子激光器為普遍，也有配和氪離子激光器或染料激光器。
在激光光源和流動室之間有兩個圓柱形透鏡，將激光光源發(fā)出的橫截面為圓形的激光光束聚焦成和細(xì)胞的直徑相近，在這種橢圓形激光光斑內(nèi)激光能量成正態(tài)分布，使通過激光檢測區(qū)的細(xì)胞受照強度一致。而光學(xué)系統(tǒng)則是由若干組透鏡、小孔、濾光片組成，主要作用是將不同波長的熒光信號送到不同的光電倍增管。
光電管和檢測系統(tǒng)
經(jīng)熒光染色的細(xì)胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)變成電信號而進行測量的。光電倍增管（PMT）最為常用。PMT的響應(yīng)時間短，僅為ns數(shù)量級；光譜響應(yīng)特性好，在200～900nm的光譜區(qū)，光量子產(chǎn)額都比較高。也有用硅光電二極管的，它在強光下穩(wěn)定性比PMT好。
計算機和分析系統(tǒng)
經(jīng)放大后的電信號被送往計算機分析器。多道的道數(shù)是和電信號的脈沖高度相對應(yīng)的，也是和光信號的強弱相關(guān)的。對應(yīng)道數(shù)年縱坐標(biāo)通常代表發(fā)出該信號的細(xì)胞相對數(shù)目。多道分析器出來的信號再經(jīng)模-數(shù)轉(zhuǎn)換器輸往微機處理器編成數(shù)據(jù)文件
流式細(xì)胞儀主要用到三類濾光片：
1：長波通濾光片（LPF）--只允許特定波長以上的光線通過；
2：短波通濾光片（SPF）--只允許特定波長以下的光線通過；
3：帶通濾光片（BPF）--只允許特定波長的光線通過
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