高效液相色譜法測定生物發(fā)酵產(chǎn)品中成分腺苷的含量
本方法適用于蟲草、菌粉、靈芝等產(chǎn)品系列發(fā)酵產(chǎn)品
1 儀器與試劑
1.1儀器
高效液相色譜儀( LC-500A) 配SPD-500紫外檢測器
N2000色譜工作站；
超聲波清洗器，十萬分之一天平；
1.2試劑
腺苷對照品含量≥99.0
色譜純甲醇，水為超純水其他為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件
色譜柱 C18( 150 mm × 4.6 mm，5μm)
流動相：甲醇：磷酸鹽緩沖液（pH 6.5） = 10：1
流速為1.0 ml /min
檢測波長為260nm；柱溫為室溫；進樣量為10 μl。
2.2 供試品溶液的制備
取擬青霉約1.0g，精密稱定，置于50 ml 量瓶，加入20% 甲醇定容至50 ml，密塞，稱定重量，超聲20min，放至室溫后稱重，用甲醇補足減失的重量。用0. 45 μm 微孔濾膜濾過后供分析。
腺苷標準品譜圖
擬青霉樣品譜圖
頭孢菌樣品譜圖
3. 液相色譜儀器配置
Pos | Product Number | Qty |
1 | WK500-0102-002 LC-500A高壓輸液泵 | 1 |
2 | WK500-1415-004 儀器啟動工具包 | 1 |
3 | WK500-0101-001 SPD-500可變波長紫外檢測器 | 1 |
4 | WK500-0413-003 7725i手動進樣閥 | 1 |
5 | WK500-0401-027 C18 柱 250*4.6 | 1 |
6 | WK500-1106-002 溶劑托盤 | 1 |
7 | WK500-0301-001 色譜工作軟件 | 1 |
8 | 樣品前處理包 | 1 |
（超聲波1臺，真空泵1臺，溶劑過濾器1套， | ||
濾器、濾膜各2包） |
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