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            艾本德
            pcr儀 基因擴(kuò)增儀
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            環(huán)境監(jiān)測設(shè)備

            PCR現(xiàn)在又?jǐn)U增不出來了怎么辦

            時間:2019/4/23閱讀:5042
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            PCR新手指南:PCR現(xiàn)在又?jǐn)U增不出來了怎么辦?

            這個問題是常見的問題,就是一個PCR實(shí)驗(yàn)一直都做得很好,停一段時間后再做就不行了。一通亂找原因后還是不行,很痛苦!

            找問題要從大到小:

            1、PCR擴(kuò)增體系問題
            用其他正在進(jìn)行的且擴(kuò)增正常的模板和引物證明PCR擴(kuò)增體系沒有問題,即PCR反應(yīng)混合物、水、取液器、PCR儀、操作等都是好的(陽性對照)

            2、引物問題
            用以前擴(kuò)增產(chǎn)物做模板(稀釋50倍),證明引物沒有問題

            3、只是模板問題了。
            因?yàn)闃颖窘到獾目赡苄员纫锝到獾目赡苄愿叩枚?。也可能是樣本中的抑制物過多(新鮮時沒有溶出來)。

            不要靠運(yùn)氣找問題,先做條很重要。亂找問題常常讓人失去信心的。

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