熒光分光光度計用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各種角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過對這些參數(shù)的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計的激發(fā)波長掃描范圍是200-800NM??捎糜谝后w、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。熒光分光光度計工作原理和儀器結(jié)構(gòu)。 熒光分光光度計原理:由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。
熒光分光光度計光源:為高壓汞蒸汽燈或氙弧燈,然后能發(fā)射出強度較大的連續(xù)光譜,且在300NM-400NM范圍內(nèi)強度幾乎相等,故較常用。
激發(fā)單色器:置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或*單色器,篩選出特定的激發(fā)光譜。
發(fā)射單色器:置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器,常采用光柵為單色器。篩選出光譜。
樣品室:通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時,光源與檢測器成直角安排,測量固體時,光源與檢測器成銳角安排。
檢測器:一般用光電管或光電倍增管作檢測器。可將光信號放大并轉(zhuǎn)為電信號。
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