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| 直接在基因組 DNA 上進(jìn)行的多重 PCR 分析。 使用 ChargeSwitch® 微珠(對照)或 ChargeSwitch® EasyPlex™ gDNA 試劑盒從冷凍的血液中分離基因組 DNA。使用針對 CFTR 基因優(yōu)化的引物混合物 (Tm Bioscience) 和 Invitrogen 的 Platinum® Taq 聚合酶 (Invitrogen Platinum® Taq Polymerase) 直接在包被板的各孔中進(jìn)行多重 PCR 反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物在 4–12% 的梯度聚丙烯酰胺凝膠上進(jìn)行分離,并用 SYBR® Gold 核酸凝膠染料 (SYBR® Gold Nucleic Acid Gel Stain) 進(jìn)行染色。在 ChargeSwitch® EasyPlex™ 孔板的微孔內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)時(shí),其效果與在 ChargeSwitch® 微珠純化模板上進(jìn)行的反應(yīng)相同。M:100bp DNA ladder, NTC:無模板對照 |
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